沉默Sam68基因表達(dá)抑制乳腺癌細(xì)胞的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化
發(fā)布時(shí)間:2017-12-05 05:05
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【摘要】:目的 :探討沉默Sam68(Src-associated substrated during mitosis of 68KD)基因表達(dá)對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影響。方法 :采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)具有不同侵襲能力的乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞中Sam68 m RNA及蛋白的表達(dá)情況;選擇Sam68高表達(dá)的MDA-MB-231細(xì)胞,利用si RNA技術(shù)沉默細(xì)胞中內(nèi)源性Sam68蛋白的表達(dá)。隨后,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)EMT標(biāo)志物E-鈣黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)m RNA及蛋白的表達(dá);采用CCK-8法、Transwell小室遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)沉默Sam 68基因表達(dá)后對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞增殖,遷移和侵襲的影響。結(jié)果 :Sam68蛋白在高侵襲性的間質(zhì)型乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞中高表達(dá)(P0.05);采用si RNA沉默MDA-MB-231細(xì)胞內(nèi)源性Sam68蛋白的表達(dá)后,E-cadherin的表達(dá)水平明顯上調(diào)(P0.05),而vimentin的表達(dá)水平明顯下調(diào)(P0.05);MDA-MB-231細(xì)胞的增殖能力以及細(xì)胞的遷移和侵襲能力明顯降低(P值均0.05),細(xì)胞可能發(fā)生間質(zhì)-上皮轉(zhuǎn)化。結(jié)論 :Sam68在高侵襲性乳腺癌細(xì)胞中高表達(dá),沉默Sam68基因的表達(dá)能抑制EMT的發(fā)生,并降低細(xì)胞增殖、侵襲和遷移能力。
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院乳腺外科;
【基金】:廣東省科技廳基金項(xiàng)目(編號(hào):2010B031600294) 廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):2015A030313462)~~
【分類(lèi)號(hào)】:R737.9
【正文快照】:
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1 楊彬;馮德輝;;沉默Sam68對(duì)鼻咽癌5-8F細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年02期
,本文編號(hào):1253636
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