本文關(guān)鍵詞：DOTAP脂質(zhì)體介導(dǎo)VEGF基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細(xì)胞及目的基因的表達(dá)

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【摘要】：目的:研究脂質(zhì)體介導(dǎo)的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細(xì)胞(hASCs)及VEGF的表達(dá)。方法:膠原酶消化吸脂術(shù)脂肪,收獲細(xì)胞沉淀,培養(yǎng)至第4代時(shí)利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表型,并誘導(dǎo)其成脂成骨分化,鑒定為hASCs。轉(zhuǎn)染組利用DOTAP脂質(zhì)體將pIRES2-EGFP-VEGF質(zhì)粒轉(zhuǎn)入hASCs,對(duì)照組為脂質(zhì)體空載。免疫熒光染色檢測(cè)hASCs內(nèi)VEGF的表達(dá),ELISA檢測(cè)上清液中VEGF濃度的變化。結(jié)果:1ml吸脂術(shù)脂肪可得到(4.38±0.21)×10~5個(gè)細(xì)胞,第4代時(shí)hASCs高表達(dá)CD90(81.49%),低表達(dá)CD19(6.37%)、CD31(14.91%)、CD34(17.56%)和CD45(15.39%),誘導(dǎo)分化后油紅O和茜素紅染色均呈陽(yáng)性。分光光度計(jì)顯示質(zhì)粒DNA濃度為595ng/μl。轉(zhuǎn)染組hASCs表達(dá)GFP和VEGF,轉(zhuǎn)染效率為(43.69±18.53)%;對(duì)照組不表達(dá)GFP,但表達(dá)較低的VEGF。轉(zhuǎn)染組VEGF的光密度是對(duì)照組的2.13倍,其上清液中的VEGF濃度隨時(shí)間顯著上升,與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:DOTAP脂質(zhì)體可成功將pIRES2-EGFP-VEGF質(zhì)粒轉(zhuǎn)入hASCs,轉(zhuǎn)染后的VEGF表達(dá)和分泌水平顯著提高。
【作者單位】： 美國(guó)德克薩斯大學(xué)MD安德森腫瘤中心整形外科;解放軍總醫(yī)院整形修復(fù)科;美國(guó)貝勒醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)系腎臟學(xué)部;北京美萊美容整形醫(yī)院口腔美容中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(No:81272123,No:81571864)
【分類號(hào)】：R622
【正文快照】： 脂肪移植是近年來(lái)整形美容專業(yè)的熱點(diǎn),脂肪組織分布廣泛,通過(guò)吸脂術(shù)獲取簡(jiǎn)便,損傷小,患者接受度高。解放軍總醫(yī)院整形修復(fù)科利用脂肪移植進(jìn)行除皺、隆胸、豐臀等美容充填,或修復(fù)難愈創(chuàng)面,重建腫瘤或外傷導(dǎo)致的各種軟組織缺損等。但是脂肪移植早期血管化程度低,大量移植常因缺

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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1 陳猶白;張啟旭;Butler C E;吳葉文;張麗萍;董江陵;陳聰慧;韓巖;;DOTAP脂質(zhì)體介導(dǎo)VEGF基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細(xì)胞及目的基因的表達(dá)[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2016年12期

2 陳猶白;陳聰慧;Qixu Zhang;韓巖;;脂肪干細(xì)胞成骨分化的研究進(jìn)展[J];中華損傷與修復(fù)雜志(電子版);2016年02期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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2 劉家寅;劉光源;田發(fā)明;張柳;劉會(huì)仁;胡克儉;;辛伐他汀通過(guò)p38MAPK信號(hào)通路誘導(dǎo)BMSCs成骨分化的研究[J];中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志;2016年02期

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10 吳尉;梁芳;宋小琴;胡平安;劉敏;;人脂肪干細(xì)胞的提取和鑒定[J];中國(guó)組織工程研究;2015年28期

【相似文獻(xiàn)】

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3 沈慶煜,呂瑞妍,李梅,王莉梅,肖頌華,邢詒剛;腺病毒載體介導(dǎo)的VEGF基因轉(zhuǎn)染對(duì)C17.2神經(jīng)干細(xì)胞凋亡的影響[J];中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版);2005年03期

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 張輝;重組合異種骨復(fù)合VEGF基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)兔非創(chuàng)傷性股骨頭壞死修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘭州大學(xué);2008年

2 李R，

本文編號(hào)：1249602