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油用向日葵FAD2-1基因RT-PCR體系的建立與優(yōu)化

發(fā)布時(shí)間:2017-12-02 20:18

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【摘要】:為了建立向日葵FAD2-1基因高效特異的PCR擴(kuò)增體系,以油用向日葵86-1為材料提取總RNA,并反轉(zhuǎn)錄合成cDNA,以cDNA第一條鏈為模板對FAD2-1基因全長編碼序列的PCR體系進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明:根據(jù)已公布的FAD2-1序列設(shè)計(jì)3對特異性引物,每對引物設(shè)計(jì)了5個(gè)退火溫度,篩選出適于該基因PCR擴(kuò)增的引物及其退火溫度,并將PCR擴(kuò)增條件中循環(huán)數(shù)縮短為30次,延伸時(shí)間縮短為7min,此改進(jìn)提高了PCR反應(yīng)的效率。
【作者單位】: 黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所;
【基金】:黑龍江省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新工程資助項(xiàng)目(2014QN020) 哈爾濱市科學(xué)技術(shù)局科技創(chuàng)新人才資助項(xiàng)目(2013RFQYJ027);哈爾濱市科學(xué)技術(shù)局科技創(chuàng)新人才資助項(xiàng)目(2013RFQYJ034) 國家向日葵現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系資助項(xiàng)目(CARS-16)
【分類號】:S565.5
【正文快照】: 向日葵屬菊科向日葵屬,是世界上最重要的油料作物之一,油用型向日葵生產(chǎn)的葵花油不飽和脂肪酸含量高于大豆、花生、油菜等油料作物,是優(yōu)質(zhì)的保健食用油!12-脂肪酸脫氫酶基因FAD2-1,其主要作用是在單不飽和脂肪酸油酸(Oleic Acid,OA,18∶1Δ9)的第1 2和1 3位碳原子之間插入

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