本文關(guān)鍵詞：葛根素對(duì)成骨細(xì)胞中miRNA-204的調(diào)控及其與Runx2基因表達(dá)的關(guān)系

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【摘要】：目的研究葛根素作用于成骨細(xì)胞MC3T3-E1后miRNA表達(dá)的變化以及與Runx2基因表達(dá)的關(guān)系。方法 RT-PCR和western blot法檢測(cè)Runx2的mRNA表達(dá)水平和蛋白表達(dá)水平;miRNA表達(dá)譜檢測(cè)葛根素作用于成骨細(xì)胞后可能靶向Runx2的miRNA;Target Scan、Pic Tar等靶點(diǎn)預(yù)測(cè)軟件預(yù)測(cè)靶向Runx2的miRNA;RT-PCR測(cè)定miRNA-204表達(dá)量;構(gòu)建Runx23’UTR/突變型Runx2 3’UTR重組質(zhì)粒、合成miRNA-204mimics和miRNA-204NC共轉(zhuǎn)染MC3T3-E1細(xì)胞,雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)驗(yàn)證靶基因;miRNA-204mimics和miRNA-204inhibitor轉(zhuǎn)染MC3T3-E1細(xì)胞,RT-PCR和western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后Runx2的mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量的變化。結(jié)果與空白組比較葛根素作用后Runx2的miRNA和蛋白表達(dá)均上升;miRNA-204表達(dá)水平下降;表達(dá)譜和靶點(diǎn)預(yù)測(cè)軟件預(yù)測(cè)靶向Runx2的miRNA共同有miR-204、miR-3072-3p等;過(guò)表達(dá)miRNA-204后Runx2的蛋白表達(dá)水平下降,干擾miRNA-204表達(dá)后Runx2的蛋白水平上升。結(jié)論葛根素在成骨細(xì)胞中可通過(guò)調(diào)節(jié)靶向Runx2基因的miRNA-204來(lái)促進(jìn)細(xì)胞增值分化。
【作者單位】： 南京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物教研室;
【基金】：江蘇省科技廳項(xiàng)目(BK20131417)
【分類號(hào)】：R285
【正文快照】： 骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis,OP)是一種因骨量低下、骨微結(jié)構(gòu)破壞,導(dǎo)致骨脆性增加、易發(fā)生骨折為特征的全身性骨病(世界衛(wèi)生組織,WHO)[1],是由于成骨細(xì)胞(OB)形成的新骨量少于被破骨細(xì)胞(OC)吸收的舊骨量,骨代謝從而發(fā)生負(fù)平衡,導(dǎo)致骨總量丟失所致。Runx2是骨發(fā)育過(guò)程中激活與啟

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1241341