本文關鍵詞：葛根素對成骨細胞中miRNA-204的調控及其與Runx2基因表達的關系

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【摘要】：目的研究葛根素作用于成骨細胞MC3T3-E1后miRNA表達的變化以及與Runx2基因表達的關系。方法 RT-PCR和western blot法檢測Runx2的mRNA表達水平和蛋白表達水平;miRNA表達譜檢測葛根素作用于成骨細胞后可能靶向Runx2的miRNA;Target Scan、Pic Tar等靶點預測軟件預測靶向Runx2的miRNA;RT-PCR測定miRNA-204表達量;構建Runx23’UTR/突變型Runx2 3’UTR重組質粒、合成miRNA-204mimics和miRNA-204NC共轉染MC3T3-E1細胞,雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)驗證靶基因;miRNA-204mimics和miRNA-204inhibitor轉染MC3T3-E1細胞,RT-PCR和western blot檢測轉染前后Runx2的mRNA表達量和蛋白表達量的變化。結果與空白組比較葛根素作用后Runx2的miRNA和蛋白表達均上升;miRNA-204表達水平下降;表達譜和靶點預測軟件預測靶向Runx2的miRNA共同有miR-204、miR-3072-3p等;過表達miRNA-204后Runx2的蛋白表達水平下降,干擾miRNA-204表達后Runx2的蛋白水平上升。結論葛根素在成骨細胞中可通過調節(jié)靶向Runx2基因的miRNA-204來促進細胞增值分化。
【作者單位】： 南京中醫(yī)藥大學基礎醫(yī)學院生物教研室;
【基金】：江蘇省科技廳項目(BK20131417)
【分類號】：R285
【正文快照】： 骨質疏松癥(osteoporosis,OP)是一種因骨量低下、骨微結構破壞,導致骨脆性增加、易發(fā)生骨折為特征的全身性骨病(世界衛(wèi)生組織,WHO)[1],是由于成骨細胞(OB)形成的新骨量少于被破骨細胞(OC)吸收的舊骨量,骨代謝從而發(fā)生負平衡,導致骨總量丟失所致。Runx2是骨發(fā)育過程中激活與啟

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