本文關(guān)鍵詞：農(nóng)桿菌介導(dǎo)McCHIT1基因遺傳轉(zhuǎn)化水稻莖尖研究

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【摘要】：為了提高農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻莖尖遺傳轉(zhuǎn)化效率,筆者以貴州特有的地方水稻品種‘平塘黑糯’莖尖為材料,以含有Ubiqutin啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)苦瓜幾丁質(zhì)酶基因McCHIT1表達(dá)的植物表達(dá)載體p Cambia-UbiMcCHIT1為轉(zhuǎn)化載體,采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),系統(tǒng)研究了菌液OD600值、真空處理時(shí)間和真空滲透壓強(qiáng)對(duì)水稻莖尖遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響。結(jié)果表明:在3個(gè)因素中,真空處理時(shí)間是影響水稻轉(zhuǎn)化效率和死亡率的最關(guān)鍵因素。農(nóng)桿菌介導(dǎo)‘平塘黑糯’莖尖遺傳轉(zhuǎn)化的最優(yōu)條件為農(nóng)桿菌菌液濃度OD600為1.0、真空處理時(shí)間為7 min、真空滲透壓強(qiáng)為15 k Pa。GUS組織化學(xué)染色和PCR分子鑒定表明,通過(guò)本研究?jī)?yōu)化的農(nóng)桿菌介導(dǎo)水稻莖尖遺傳轉(zhuǎn)化體系,已將苦瓜的幾丁質(zhì)酶基因McCHIT1已整合到水稻基因組中,獲得轉(zhuǎn)McCHIT1基因‘平塘黑糯’新種質(zhì)。
【作者單位】： 貴州大學(xué)農(nóng)業(yè)生物工程研究院/生命科學(xué)學(xué)院山地植物資源保護(hù)與種質(zhì)創(chuàng)新省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;貴州省山地生態(tài)與農(nóng)業(yè)生物工程2011協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國(guó)家轉(zhuǎn)基因新品種培育重大專項(xiàng)“安全轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究”(2014ZX08010-003) 貴州省重大科技專項(xiàng)“貴州特有水稻種質(zhì)資源優(yōu)異基因克隆及育種技術(shù)研究應(yīng)用”(黔科合重大專項(xiàng)字[2012]6005號(hào))
【分類(lèi)號(hào)】：S511
【正文快照】： transformation system for rice shoot tips by Agrobacterium-mediated method.0引言水稻(Oryza sativa L.)是世界上重要的糧食作物,其產(chǎn)量直接影響全球的糧食安全。真菌性病害是引起水稻減產(chǎn)的主要原因之一。據(jù)統(tǒng)計(jì),每年有6000萬(wàn)左右人口的糧食短缺是由稻瘟病引起的[1]。因，

本文編號(hào)：1237281