本文關鍵詞：農(nóng)桿菌介導McCHIT1基因遺傳轉化水稻莖尖研究

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【摘要】：為了提高農(nóng)桿菌介導的水稻莖尖遺傳轉化效率,筆者以貴州特有的地方水稻品種‘平塘黑糯’莖尖為材料,以含有Ubiqutin啟動子驅動苦瓜幾丁質酶基因McCHIT1表達的植物表達載體p Cambia-UbiMcCHIT1為轉化載體,采用正交試驗設計,系統(tǒng)研究了菌液OD600值、真空處理時間和真空滲透壓強對水稻莖尖遺傳轉化效率的影響。結果表明:在3個因素中,真空處理時間是影響水稻轉化效率和死亡率的最關鍵因素。農(nóng)桿菌介導‘平塘黑糯’莖尖遺傳轉化的最優(yōu)條件為農(nóng)桿菌菌液濃度OD600為1.0、真空處理時間為7 min、真空滲透壓強為15 k Pa。GUS組織化學染色和PCR分子鑒定表明,通過本研究優(yōu)化的農(nóng)桿菌介導水稻莖尖遺傳轉化體系,已將苦瓜的幾丁質酶基因McCHIT1已整合到水稻基因組中,獲得轉McCHIT1基因‘平塘黑糯’新種質。
【作者單位】： 貴州大學農(nóng)業(yè)生物工程研究院/生命科學學院山地植物資源保護與種質創(chuàng)新省部共建教育部重點實驗室;貴州省山地生態(tài)與農(nóng)業(yè)生物工程2011協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家轉基因新品種培育重大專項“安全轉基因技術研究”(2014ZX08010-003) 貴州省重大科技專項“貴州特有水稻種質資源優(yōu)異基因克隆及育種技術研究應用”(黔科合重大專項字[2012]6005號)
【分類號】：S511
【正文快照】： transformation system for rice shoot tips by Agrobacterium-mediated method.0引言水稻(Oryza sativa L.)是世界上重要的糧食作物,其產(chǎn)量直接影響全球的糧食安全。真菌性病害是引起水稻減產(chǎn)的主要原因之一。據(jù)統(tǒng)計,每年有6000萬左右人口的糧食短缺是由稻瘟病引起的[1]。因，

本文編號：1237281