本文關(guān)鍵詞：太子參3個肌動蛋白基因片段的克隆與序列分析

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【摘要】：目的克隆太子參肌動蛋白(Actin)基因片段并進(jìn)行序列分析。方法利用植物Actin基因的保守序列設(shè)計簡并引物,通過RT-PCR和抑制PCR擴(kuò)增太子參Actin基因核心片段。利用半定量RT-PCR分析太子參Actin基因在不同種源、不同器官、不同生長發(fā)育時期的表達(dá)情況。結(jié)果通過RT-PCR獲得3條太子參Actin基因的核心片段,長度均為760 bp,依次命名為PhACT1、PhACT2、PhACT3。通過抑制PCR及序列拼接后3條核心片段依次延長至1 008、1 008、975 bp,分別編碼336、336、325個氨基酸殘基。半定量RT-PCR分析表明PhACT2和PhACT3基因在不同種源、不同器官、不同生長發(fā)育時期的表達(dá)量基本恒定,PhACT1基因存在一定的差異。結(jié)論首次從太子參中克隆得到3條太子參Actin基因序列,并確定PhACT2基因適合作為太子參功能基因表達(dá)分析的內(nèi)參基因。
【作者單位】： 貴陽中醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(81460579) 貴州省普通高等學(xué)校特色重點實驗室建設(shè)項目(黔教合KY字[2013]108號) 施秉中藥材產(chǎn)業(yè)科技合作專項計劃項目[施中藥科合專項(2014)第6號] 貴州省研究生工作站建設(shè)項目(黔教研合JYSZ字[2014]016)
【分類號】：S567.53;Q943.2
【正文快照】： 基因表達(dá)分析是了解植物功能基因的表達(dá)規(guī)律,解析植物復(fù)雜代謝網(wǎng)絡(luò)并對其進(jìn)行表達(dá)調(diào)控的重要手段之一[1]。通過實時熒光定量PCR獲得目的基因的相對表達(dá)量是目前最為常用的基因表達(dá)檢測方法。因此,從植物中篩選出在不同器官、不同發(fā)育時期表達(dá)基本恒定的管家基因作為研究的內(nèi)參

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