本文關鍵詞：大豆干旱脅迫下miRNA與mRNA熒光定量PCR內(nèi)參基因的篩選

  更多相關文章： 大豆 干旱脅迫 熒光定量PCR 內(nèi)參基因 成熟miRNA 前體miRNA 靶基因mRNA

【摘要】：【目的】通過分析大豆中候選內(nèi)參基因的穩(wěn)定性,篩選大豆干旱脅迫處理條件下適合成熟miRNA、前體miRNA及靶基因mRNA熒光定量PCR的內(nèi)參基因�！痉椒ā恳愿珊得{迫處理后的大豆根和葉片為材料,選擇了5個成熟miRNAs和5個傳統(tǒng)的看家基因作為候選內(nèi)參基因,利用GeNorm和NormFinder程序?qū)?0個候選內(nèi)參基因的穩(wěn)定性進行評價�！窘Y(jié)果】在干旱脅迫下,大豆根、葉片中,成熟miRNA定量最合適的單個內(nèi)參基因分別為miR156a、miR167a,最合適的內(nèi)參基因組合分別為miR1520d與miR156a、miR1520d與miR167a。前體miRNA和靶基因mRNA定量最合適的單個內(nèi)參基因分別為Fbox、Act11,最合適的內(nèi)參基因組合分別為Act11與Fbox、Act11與EF1A�！窘Y(jié)論】篩選出大豆干旱脅迫條件下成熟miRNA、前體miRNA及其對應靶基因mRNA的熒光定量PCR的內(nèi)參基因,最穩(wěn)定內(nèi)參基因數(shù)目為2個。
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學生物反應器與藥物開發(fā)教育部工程研究中心;吉林農(nóng)業(yè)大學生命科學學院;東北師范大學附屬中學;
【基金】：國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(2014ZX08010-002) 國家自然科學基金項目(31271746;31201144) 吉林省發(fā)改委項目(JF2012C002-04)
【分類號】：S565.1
【正文快照】： 實時熒光定量PCR(qPCR)因其靈敏度高、成本較低、高通量及方便快捷等優(yōu)點,已成為樣本中基因表達定性與定量的常規(guī)方法之一。在qPCR檢測基因表達變化過程中,選擇適當?shù)膬?nèi)參基因進行標準化,以減少檢測樣本間的cDNA差異是必須的[1]。理想的內(nèi)參基因應該在不同試驗條件、不同時間

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