發(fā)布時間：2017-11-21 18:18

  本文關(guān)鍵詞：高粱SbSKIP基因的克隆及其在煙草中的抗旱功能分析

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【摘要】：SKIP(ski-interacting protein)是一種RNA代謝相關(guān)蛋白,在植物抵抗非生物脅迫傷害中起著很重要的調(diào)節(jié)作用,本研究克隆了高粱(Sorghum bicolor)Sb SKIP基因,c DNA編碼區(qū)全長1 485 bp,編碼494個氨基酸;進(jìn)化樹分析表明,高粱Sb SKIP基因編碼的氨基酸序列與節(jié)節(jié)麥(Aegilops tauschii)相似性為52%;定量PCR分析表明,在模擬干旱條件下Sb SKIP基因表達(dá)量上調(diào),在干旱處理16 h后,表達(dá)量顯著增加了2倍以上。構(gòu)建植物表達(dá)載體p SH-Sb SKIP,利用農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)介導(dǎo)的葉盤法遺傳轉(zhuǎn)化煙草(Nicotiana tabacum),獲得25個轉(zhuǎn)基因植株。選取3個不同株系TP4、TP9和TP13,在不同濃度甘露醇模擬干旱條件下對種子發(fā)芽率和幼苗期進(jìn)行抗旱性分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在300 mmol/L甘露醇處理10 d,種子的發(fā)芽率比野生型高60%以上,而且從苗期根的生長發(fā)現(xiàn),野生型根的生長明顯受到抑制。在自然條件下生長的煙草幼苗,用20%PEG 6000處理14 d,結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)基因煙草正常生長,而野生型煙草大部分葉片黃化甚至出現(xiàn)萎蔫,其中轉(zhuǎn)基因植株超氧化物歧化酶(super-oxide dismutase,SOD)的平均活性值比野生型高91.2%,H2O2和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量分別比野生型降低了42%和32.7%,可溶性糖(soluble sugar)含量達(dá)野生型的1.1倍。結(jié)果表明,Sb SKIP基因表達(dá)提高了煙草植株的干旱耐受能力。本研究為進(jìn)一步研究Sb SKIP基因功能提供依據(jù),同時該基因的克隆和功能分析可為創(chuàng)制轉(zhuǎn)基因抗旱材料提供基礎(chǔ)資料。
【作者單位】： 貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院/農(nóng)業(yè)生物工程研究院;貴州大學(xué)山地植物資源保護(hù)與種質(zhì)創(chuàng)新省部共建教育部重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.31160149) 國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(No.2014ZX08010-003-2016ZX08010-003)
【分類號】：Q943.2
【正文快照】： 陽550025*同等貢獻(xiàn)作者干旱等非生物脅迫是導(dǎo)致農(nóng)作物減產(chǎn)和品質(zhì)降低的主要因素之一。其在全球范圍內(nèi)對主要糧食作物造成的平均受害范圍不低于50%(Wang etal.,2003)。高粱(Sorghum bicolor)是世界上僅次于小麥(Triticum aestivum)、水稻(Oryza sativa)和玉米(Zea mays)的第四，

本文編號：1211847