本文關(guān)鍵詞：紫蘇FAD3基因RNA干擾載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化

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【摘要】：本研究利用RNA干擾的方法抑制紫蘇ω-3脂肪酸脫氫酶基因FAD3的表達(dá),以期得到低ALA含量的轉(zhuǎn)基因植株。根據(jù)紫蘇FAD3基因(Gen Bank登錄號(hào)為KC990786.1)序列設(shè)計(jì)含有不同酶切位點(diǎn)的特異性擴(kuò)增引物,通過擴(kuò)增獲得長度為258 bp的RNA干擾片段,構(gòu)建以Ca MV35S啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)表達(dá)的紫蘇FAD3基因RNA干擾表達(dá)載體p FGC5941M-FAD3I,將該載體轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)桿菌GV2301后,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法進(jìn)行紫蘇的遺傳轉(zhuǎn)化,經(jīng)除草劑抗性篩選和PCR檢測(cè)獲得1株陽性轉(zhuǎn)基因植株。利用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)野生型和轉(zhuǎn)基因陽性苗的FAD3基因進(jìn)行了表達(dá)分析,結(jié)果顯示,陽性植株中FAD3基因的表達(dá)受到顯著抑制,FAD3基因表達(dá)量降低了80%,說明此研究構(gòu)建的FAD3基因RNA干擾載體對(duì)該基因表達(dá)沉默是有效的,為FAD3基因在不飽和脂肪酸代謝過程中的功能研究提供了理論依據(jù)。
【作者單位】： 重慶師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院重慶市植物環(huán)境適應(yīng)分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31171588)資助
【分類號(hào)】：S565.9;Q943.2
【正文快照】： Construction of the RNAi Vector of FAD3 Gene and Its GeneticTransformation in Perilla FrutescensHuang Xinglin Gao Tianshu Lu Jun Xing Bai Ruiying Zhang Tao*College of Life Sciences,Chongqing Normal University,Chongqing Key Laboratory of Molecular Biology

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本文編號(hào)：1206332