實時定量PCR 檢測轉基因水稻科豐6 號插入拷貝數(shù)和轉基因含量.pdf 全文免費
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基金項目: 轉基因重大專項轉基因水稻核酸精準檢測技術研究(No.2008ZX08012001-002)收稿日期:2011-07-29接受日期:2011-09-22研究報告Letter?實時定量PCR檢測轉基因水稻科豐6號插入拷貝數(shù)和轉基因含量王渭霞賴鳳香洪利英傅強*中國水稻研究所, 杭州310006*通訊作者,qiangfu1@摘要建立轉基因成分靈敏、準確的定量標識是實施轉基因安全閾值管理的一個基本步驟, 其中實時定量PCR技術是檢測產(chǎn)品中轉基因含量的主要技術方法。本研究利用該技術確定了雙價(cry1Ac+CpTi)轉基因抗蟲水稻(Oryzasativa)科豐6?號中有3個拷貝的外源基因插入。通過對外源基因Bt?和轉化事件特異的邊界特異序列為對象的絕對定量和相對定量檢測方法的研究,發(fā)現(xiàn)以邊界特異序列為對象的事件特異性檢測和以目的基因Bt?為對象的檢測都能夠滿足相對定量檢測的要求。在100ng基因組DNA?中,Bt?基因和特異性檢測的相對定量檢測限分別為0.1%和0.5%, 在絕對定量檢測中, 特異性檢測的檢測限為5?個拷貝。不同檢測方法對4?個已知轉基因含量的樣品檢測結果與預期均一致。結果表明, 以轉基因產(chǎn)品占總產(chǎn)品比例為定義的轉基因含量的測定中,多拷貝或單拷貝基因為對象的不同定量方法的檢測對轉基因產(chǎn)品的相對定量結果沒有影響, 本研究對...
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本文編號:119720
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