本文關(guān)鍵詞：表達(dá)外源DsCOR轉(zhuǎn)基因擬南芥的篩選及其抗寒性

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【摘要】：為驗(yàn)證播娘蒿抗寒基因DsCOR的抗寒功能,在實(shí)驗(yàn)室前期DsCOR基因大量研究的基礎(chǔ)上,本研究通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)花序浸染法把誘導(dǎo)型表達(dá)載體PBI121-DsCORpro681-DsCOR轉(zhuǎn)入COR15a缺陷型擬南芥中(A-S),篩選獲得轉(zhuǎn)DsCOR基因陽(yáng)性苗(A-I),并測(cè)定了A-I、A-S和野生型(A-W)擬南芥在4℃低溫脅迫下的葉片脯氨酸含量、電解質(zhì)滲透率和幼苗在-4℃下存活率等抗寒生理指標(biāo);使用Real-time quantitative RT-PCR檢測(cè)A-I在低溫脅迫下DsCOR基因的表達(dá)規(guī)律.結(jié)果顯示,A-W和A-I兩種植株葉片脯氨酸含量在低溫處理過(guò)程中顯著增加,從處理前70μg g~(-1)到處理后12h分別升至453μg g~(-1)和406μg g~(-1)并趨于穩(wěn)定,A-S葉片脯氨酸含量變化不大(30~(-1)05μg g~(-1)).隨著處理時(shí)間增加,A-S葉片電解質(zhì)滲透率升高較明顯,36 h后達(dá)到45.2%;而A-W和A-I兩種植株葉片電解質(zhì)滲透率最高分別達(dá)到14.3%和16.3%.幼苗存活率統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,A-S缺失COR15a后,在-4℃處理后該株系幼苗全部死亡,而A-W和A-I兩個(gè)株系都有較高的存活率,分別達(dá)到53%和83%.抗寒生理指標(biāo)結(jié)果表明轉(zhuǎn)DsCOR基因擬南芥的抗寒能力已得到顯著提高,達(dá)到野生型擬南芥水平.Real-time quantitative RT-PCR檢測(cè)顯示DsCOR基因在A-I中表達(dá)明顯受到低溫脅迫誘導(dǎo).綜上,DsCOR基因在COR15a缺陷型擬南芥中實(shí)現(xiàn)了成功表達(dá),并顯著提高了其抗寒性,最終驗(yàn)證了播娘蒿抗寒基因DsCOR的抗寒功能.
【作者單位】： 四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物與代謝工程四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家“十二五”科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2013BAD10B01,2014BAD02B02) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(311714 47) 四川省科技廳項(xiàng)目(2014GZX0005,2012GZ0008,2013HH0007,2013GZX0161-3,2014JCPT0005)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：Q945.78
【正文快照】： CLC Q945.78:Q78溫度是影響植物生長(zhǎng)的重要的外界條件之一,低溫環(huán)境會(huì)對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生嚴(yán)重的制約作用.因此通過(guò)研究植物抗寒性,改良植物抗寒基因以培育優(yōu)良抗寒植物具有非常重要的意義.生活在寒冷高原上的一些植物其本身就具有極強(qiáng)的耐寒性,如播娘蒿Descuminia sophia[1],

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本文編號(hào)：1194706