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sfp基因轉化增強了Bacillus subtilis 168的定殖能力和對黃瓜莖內枯萎病菌的抑制作用

發(fā)布時間:2017-11-16 22:04

  本文關鍵詞:sfp基因轉化增強了Bacillus subtilis 168的定殖能力和對黃瓜莖內枯萎病菌的抑制作用


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【摘要】:枯草芽胞桿菌B006是一株防治黃瓜枯萎病的高效菌株,可產(chǎn)生脂肽類抗生素表面活性素surfactin和芬枯草菌素fengycin。為深入了解surfactin在根際的作用,本研究通過同源重組的方法將生防芽胞桿菌B006菌株中編碼4′-磷酸泛酰巰基乙胺轉移酶Sfp的sfp基因整合到不產(chǎn)生surfactin的模式菌株B.subtilis168(B168)基因組中,獲得了重組菌株B168S。重組菌株B168S在1%淀粉平板上不水解淀粉,在5%血平板上產(chǎn)生透明溶血圈;HPLC-ESI-MS檢測表明菌株B168S在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)液中培養(yǎng)48 h后可產(chǎn)生surfactin。平板對峙試驗表明菌株B168S在黃瓜根分泌物培養(yǎng)基上對Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum(Foc)菌絲生長有一定的抑制作用,抑制率R2/R1為1.22;平板菌落計數(shù)法測定表明,將菌懸液(10~6 cfu/m L)浸泡90 min的黃瓜種子播種于無菌石英砂3 d后,菌株B168S在黃瓜根基部和根尖的定殖量分別為菌株B168的2~3倍和9~10倍;溫室盆栽試驗表明,黃瓜苗用濃度為10~6 cfu/m L的B168S和B168菌懸液蘸根后,移栽到接種Foc孢子(10~5孢子/g)的病土中,移栽后第3周菌株B168S和B168處理的防效分別為21.1%和17.9%;對不同高度黃瓜莖中Foc的組織分離結果表明,菌株B168S處理后Foc在黃瓜莖內蔓延的相對高度低于菌株B168和Foc處理。上述結果進一步明確了surfactin可明顯促進芽胞桿菌在黃瓜根部的定殖,并通過抑制枯萎病菌的侵染和在黃瓜莖中的蔓延增強對黃瓜枯萎病的防治效果。
【作者單位】: 中國農業(yè)科學院植物保護研究所;
【基金】:國家“863”計劃(2011AA10A205) 國家大宗蔬菜產(chǎn)業(yè)技術體系建設項目(CARS-25-B-02) 國家科技支撐計劃(2012BAD19B01) 作物根腐病綜合治理技術方案(201503112)
【分類號】:S432;S476.1
【正文快照】: 枯草芽胞桿菌可產(chǎn)生表面活性素(surfactin)、伊枯草菌素(iturin)和芬枯草菌素(fengycin)3大類[1]抗生素。雖然許多研究證明iturin和fengycin對病原真菌具有抑制作用[2],但Nihorimbere等[3]研究發(fā)現(xiàn)枯草芽胞桿菌在植物根際產(chǎn)生的脂肽類抗生素主要為surfactin,另兩類抗生素含量

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本文編號:1193799

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