本文關(guān)鍵詞：sfp基因轉(zhuǎn)化增強(qiáng)了Bacillus subtilis 168的定殖能力和對黃瓜莖內(nèi)枯萎病菌的抑制作用

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【摘要】：枯草芽胞桿菌B006是一株防治黃瓜枯萎病的高效菌株,可產(chǎn)生脂肽類抗生素表面活性素surfactin和芬枯草菌素fengycin。為深入了解surfactin在根際的作用,本研究通過同源重組的方法將生防芽胞桿菌B006菌株中編碼4′-磷酸泛酰巰基乙胺轉(zhuǎn)移酶Sfp的sfp基因整合到不產(chǎn)生surfactin的模式菌株B.subtilis168(B168)基因組中,獲得了重組菌株B168S。重組菌株B168S在1%淀粉平板上不水解淀粉,在5%血平板上產(chǎn)生透明溶血圈;HPLC-ESI-MS檢測表明菌株B168S在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)液中培養(yǎng)48 h后可產(chǎn)生surfactin。平板對峙試驗(yàn)表明菌株B168S在黃瓜根分泌物培養(yǎng)基上對Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum(Foc)菌絲生長有一定的抑制作用,抑制率R2/R1為1.22;平板菌落計(jì)數(shù)法測定表明,將菌懸液(10~6 cfu/m L)浸泡90 min的黃瓜種子播種于無菌石英砂3 d后,菌株B168S在黃瓜根基部和根尖的定殖量分別為菌株B168的2~3倍和9~10倍;溫室盆栽試驗(yàn)表明,黃瓜苗用濃度為10~6 cfu/m L的B168S和B168菌懸液蘸根后,移栽到接種Foc孢子(10~5孢子/g)的病土中,移栽后第3周菌株B168S和B168處理的防效分別為21.1%和17.9%;對不同高度黃瓜莖中Foc的組織分離結(jié)果表明,菌株B168S處理后Foc在黃瓜莖內(nèi)蔓延的相對高度低于菌株B168和Foc處理。上述結(jié)果進(jìn)一步明確了surfactin可明顯促進(jìn)芽胞桿菌在黃瓜根部的定殖,并通過抑制枯萎病菌的侵染和在黃瓜莖中的蔓延增強(qiáng)對黃瓜枯萎病的防治效果。
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所;
【基金】：國家“863”計(jì)劃(2011AA10A205) 國家大宗蔬菜產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)項(xiàng)目(CARS-25-B-02) 國家科技支撐計(jì)劃(2012BAD19B01) 作物根腐病綜合治理技術(shù)方案(201503112)
【分類號】：S432;S476.1
【正文快照】： 枯草芽胞桿菌可產(chǎn)生表面活性素(surfactin)、伊枯草菌素(iturin)和芬枯草菌素(fengycin)3大類[1]抗生素。雖然許多研究證明iturin和fengycin對病原真菌具有抑制作用[2],但Nihorimbere等[3]研究發(fā)現(xiàn)枯草芽胞桿菌在植物根際產(chǎn)生的脂肽類抗生素主要為surfactin,另兩類抗生素含量

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