本文關(guān)鍵詞：腸炎沙門菌肽脯氨酰順反異構(gòu)酶SlyD的基因敲除、表達(dá)及酶學(xué)特征

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【摘要】：【目的】以腸炎沙門菌肽脯氨酰順反異構(gòu)酶SlyD為對象,構(gòu)建基因缺失株及表達(dá)純化該蛋白,為研究其在腸炎沙門菌致病性與應(yīng)激等方面的作用奠定基礎(chǔ)�！痉椒ā繀⒖糋en Bank登錄的腸炎沙門菌基因組序列設(shè)計用于slyD基因敲除及原核表達(dá)的特異引物,運用自殺質(zhì)粒介導(dǎo)的同源重組技術(shù)對腸炎沙門菌C50041 slyD基因進(jìn)行敲除,構(gòu)建C50041ΔslyD缺失株;原核表達(dá)SlyD蛋白,通過α-糜蛋白酶耦聯(lián)法對其PPIase活性進(jìn)行測定;利用生物信息學(xué)相關(guān)軟件,分析SlyD蛋白的氨基酸序列及功能域�！窘Y(jié)果】PCR鑒定與測序結(jié)果證明成功構(gòu)建了腸炎沙門菌C50041ΔslyD缺失株,其生長特性與野生株基本一致;SDS-PAGE及PPIase活性分析表明,獲得了具有生物活性的可溶性SlyD蛋白;生物信息學(xué)分析顯示SlyD蛋白由FKBP樣肽脯氨酰順反異構(gòu)酶結(jié)構(gòu)域、分子伴侶功能域和金屬結(jié)合區(qū)域3個功能區(qū)域組成�！窘Y(jié)論】成功獲得了腸炎沙門菌C50041ΔslyD缺失株和具有PPIase活性的重組SlyD蛋白。
【作者單位】： 揚州大學(xué) 江蘇省人獸共患病學(xué)重點實驗室/江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金重點國際合作項目(31320103907) 國家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(201403054) 江蘇省優(yōu)勢學(xué)科經(jīng)費資助 江蘇省研究生培養(yǎng)創(chuàng)新工程項目(KYLX15_1384)~~
【分類號】：R378.22
【正文快照】： 腸炎沙門菌(Salmonella enterica serovar enteritidis)是一種重要的人獸共患病原菌,在世界范圍內(nèi)廣泛流行。食用被污染的禽肉制品及蛋制品是人類感染腸炎沙門菌的主要來源,一般導(dǎo)致胃腸道局部疾病,引發(fā)嘔吐和腹瀉等癥狀[1]。腸炎沙門菌的致病機(jī)理及防控措施愈來愈受到人們關(guān)

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本文編號：1187896