發(fā)布時(shí)間：2017-11-14 17:26

  本文關(guān)鍵詞：NLRP3基因單核苷酸多態(tài)性TaqMan探針實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法的建立

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【摘要】：目的建立以Taq Man探針實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)為基礎(chǔ)的核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體3(Nucleotide-binding oligomerization domain,Leucine rich Repeat and Pyrin domain containing,NLRP3)基因單核苷酸多態(tài)性(Single nucleotide polymorphism,SNP)檢測(cè)方法。方法以20份健康人血液樣本為對(duì)象,選擇NLRP3基因的兩個(gè)SNP位點(diǎn)(rs3806265和rs35829419),針對(duì)每個(gè)位點(diǎn)分別設(shè)計(jì)1對(duì)PCR引物和2條Taq Man探針,進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增,對(duì)SNP位點(diǎn)進(jìn)行分型。用常規(guī)PCR和基因測(cè)序的方法對(duì)Taq Man探針實(shí)時(shí)熒光PCR分型的結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果用建立的Taq Man探針實(shí)時(shí)熒光PCR分型法對(duì)20份樣本進(jìn)行檢測(cè),其中rs3806265位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)TT基因型3份,TC基因型8份,CC基因型9份;rs35829419位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)CC基因型20份,無AC和AA基因型。分型結(jié)果與常規(guī)PCR及基因測(cè)序分型方法完全一致。結(jié)論基于Taq Man探針技術(shù)的實(shí)時(shí)熒光PCR方法簡(jiǎn)單、快速,可實(shí)現(xiàn)對(duì)NLRP3基因位點(diǎn)的分型檢測(cè)。
【作者單位】： 深圳國(guó)際旅行衛(wèi)生保健中心;深圳市檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院;深圳市疾病預(yù)防控制中心;
【基金】：深圳市科技計(jì)劃項(xiàng)目(JCYJ20120618172144499)
【分類號(hào)】：R440
【正文快照】： NOD樣受體(NOD-like receptor,NLR)s是近來研究較多的模式識(shí)別受體,屬于胞漿型,而核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體3(Nucleotide-bindingoligomerization domain,Leucine rich Repeat andPyrin domain containing,NLRP3)是其重要成員。NLRP3基因定位于染色體1q44,與凋亡相關(guān)斑點(diǎn)

【相似文獻(xiàn)】

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2 張海平;楊莉佳;陶詩(shī)沁;趙英偉;;實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)病原真菌方法的建立及其臨床應(yīng)用[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2009年12期

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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙曉麗;李曉霞;胡大春;邵建春;陳弟;;自建實(shí)時(shí)熒光PCR方法與傳統(tǒng)血培養(yǎng)方法的比較[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

2 陳丹;潘世揚(yáng);黃s顂，

本文編號(hào)：1186349