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抗根腐病的TaMYB86過表達(dá)轉(zhuǎn)基因小麥的創(chuàng)制與分子功能鑒定

發(fā)布時間:2017-11-14 04:12

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【摘要】:小麥根腐病是一種難以防治的小麥土傳病害。Ta MYB86是一個小麥中受根腐病菌誘導(dǎo)表達(dá)的MYB編碼基因。本文構(gòu)建了Ta MYB86的過表達(dá)轉(zhuǎn)基因載體p Ubi:MYC-Ta MYB86,利用基因槍介導(dǎo)法將其轉(zhuǎn)入推廣小麥品種揚麥16。對轉(zhuǎn)Ta MYB86基因小麥T0-T3代植株進(jìn)行分子特征分析和抗病鑒定。PCR檢測結(jié)果表明,外源Ta MYB86已轉(zhuǎn)入3個轉(zhuǎn)基因小麥株系中;q RT-PCR結(jié)果顯示,Ta MYB86在3個轉(zhuǎn)基因小麥株系中的表達(dá)量顯著高于在未轉(zhuǎn)基因揚麥16中的表達(dá)量,約為未轉(zhuǎn)基因揚麥16中的5~6倍,表明Ta MYB86可在轉(zhuǎn)基因小麥中過量轉(zhuǎn)錄;Western雜交結(jié)果表明,引入的Ta MYB86可在上述3個轉(zhuǎn)基因小麥株系中翻譯表達(dá)。對轉(zhuǎn)Ta MYB86基因小麥與未轉(zhuǎn)基因揚麥16進(jìn)行根腐病菌接種與抗病鑒定表明,3個轉(zhuǎn)Ta MYB86基因小麥株系在T1~T3代的根腐病病情指數(shù)分別為31.75、50.00、45.00;37.75、37.50、38.50;41.75、31.25、37.50;在3次鑒定中未轉(zhuǎn)基因揚麥16的根腐病病情指數(shù)分別為75.04、54.17、65.38,轉(zhuǎn)Ta MYB86基因小麥T1~T3代的根腐病抗性均顯著高于未轉(zhuǎn)基因揚麥16(P0.01)。與未轉(zhuǎn)基因揚麥16相比,轉(zhuǎn)Ta MYB86基因小麥中3個下游防衛(wèi)基因(PR10、PR17c和Chit1)的轉(zhuǎn)錄水平也顯著上調(diào)。以上結(jié)果說明,Ta MYB86過表達(dá)可顯著增強(qiáng)轉(zhuǎn)基因小麥的根腐病抗性,在小麥防御根腐病過程中起正向調(diào)控作用。
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所/農(nóng)作物基因資源與基因改良國家重大科學(xué)工程/農(nóng)業(yè)部麥類生物學(xué)與遺傳育種重點實驗室;
【基金】:國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(2016ZX08002-001-004) 國家自然科學(xué)基金項目(31471494)資助 The study was supported by the National Major Project for Developing New GM Crops(2016ZX08002-001-004)~~
【分類號】:S435.121.47
【正文快照】: 本研究由國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(2016ZX08002-001-004)和國家自然科學(xué)基金項目(31471494)資助。The study was supported by the National Major Project for Developing New GM Crops(2016ZX08002-001-004)and the National NaturalScience Foundation of China(3

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本文編號:1183785

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