發(fā)布時(shí)間：2017-11-14 02:29

  本文關(guān)鍵詞：HPV16E5、E6和E7基因重組慢病毒載體的構(gòu)建及其感染口腔上皮細(xì)胞

  更多相關(guān)文章： 人乳頭狀瘤病毒 HPV癌基因 慢病毒載體 口腔上皮細(xì)胞

【摘要】：目的分別構(gòu)建HPV16 E5、E6和E7癌基因的重組慢病毒載體感染人口腔上皮細(xì)胞,為研究E5基因?qū)谇簧掀ぜ?xì)胞的致癌機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法克隆HPV16 E5、E6和E7基因,分別構(gòu)建p LVX-Ac GFP-E5、p LVX-Ac GFP-E6和p LVX-Ac GFP-E7重組慢病毒載體,與包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞。收集3種慢病毒上清液,分別感染口腔上皮細(xì)胞、腺嘌呤素篩選感染細(xì)胞,RT-PCR和Western blot法檢測(cè)目的基因的表達(dá)。結(jié)果成功構(gòu)建p LVX-Ac GFP-E5、p LVX-Ac GFPE6和p LVX-Ac GFP-E7重組慢病毒載體,獲得3種慢病毒上清液,篩選得到3個(gè)穩(wěn)定的細(xì)胞株。RT-PCR和Western blot均可檢測(cè)到HPV16 E5、E6和E7基因在口腔上皮細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。結(jié)論本研究構(gòu)建的3個(gè)重組慢病毒載體能成功感染口腔上皮細(xì)胞。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院;安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院;皖南醫(yī)學(xué)院口腔醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81172574) 皖南醫(yī)學(xué)院人才引進(jìn)科研啟動(dòng)基金資助
【分類號(hào)】：R737.33
【正文快照】： 2016-03-08接收人乳頭狀瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是宮頸癌發(fā)生的主要致病因子。大量的流行病學(xué)調(diào)查資料顯示,HPV也與口腔癌的發(fā)生密切相關(guān)[1-2]。目前關(guān)于HPV與口腔癌關(guān)系的研究主要集中于對(duì)高危型HPV E6和E7基因的研究,它們都可與腫瘤抑制物結(jié)合并使其失活[3]。實(shí)際

【相似文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 侯瀟瀟;HPV16型E5基因?qū)θ擞郎谇簧掀ぜ?xì)胞E6/E7基因表達(dá)的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

，

本文編號(hào)：1183487