本文關(guān)鍵詞：水稻OsHsfA2e基因的克隆、遺傳轉(zhuǎn)化與功能分析

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【摘要】：水稻是最重要的糧食作物之一,但近年來(lái),因全球氣候變暖,氣溫升高,農(nóng)作物頻繁的遭受熱害,尤其是水稻。研究發(fā)現(xiàn),高溫會(huì)影響水稻的生長(zhǎng)發(fā)育與產(chǎn)量,極端溫度甚至?xí)䦟?dǎo)致水稻死亡。而熱激轉(zhuǎn)錄因子可以激發(fā)植物體內(nèi)的熱激反應(yīng),以應(yīng)對(duì)高溫脅迫。水稻體內(nèi)有26個(gè)熱激轉(zhuǎn)錄因子,我們利用Q-PCR技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)以及生理生化技術(shù)對(duì)水稻體內(nèi)熱激轉(zhuǎn)錄因子OsHsfA2e的功能做了系統(tǒng)的研究,研究結(jié)果如下:(1)利用Q-PCR技術(shù),在熱激條件下,發(fā)現(xiàn)OsHsfA2e基因在轉(zhuǎn)錄水平上對(duì)高溫的響應(yīng)迅速且猛烈,可以在1h內(nèi)達(dá)到94倍。(2)構(gòu)建了綠色熒光蛋白(GFP)融合表達(dá)載體,應(yīng)用亞細(xì)胞定位技術(shù)對(duì)OsHsfA2e蛋白進(jìn)行定位,試驗(yàn)結(jié)果表明,OsHsfA2e蛋白定位于細(xì)胞核上,是作為核調(diào)控因子發(fā)揮作用的。(3)通過(guò)Gateway技術(shù),成功獲得了OsHsfA2e基因的過(guò)表達(dá)株系,并擴(kuò)繁至T3代。(4)通過(guò)熱處理下對(duì)OsHsfA2e基因過(guò)表達(dá)株系和野生型株系Kitaake的表型分析發(fā)現(xiàn),當(dāng)遭受熱脅迫時(shí),過(guò)表達(dá)株系莖葉的生長(zhǎng)狀況比野生型株系要健壯,基本不發(fā)生萎蔫,而野生型株系萎蔫狀況頗為嚴(yán)重,說(shuō)明過(guò)表達(dá)株系的耐熱性比野生型的耐熱性好,證明OsHsfA2e基因可以提高植株的耐熱性。(5)通過(guò)熱處理下對(duì)過(guò)表達(dá)株系和野生型株系莖葉生理指標(biāo)的測(cè)量發(fā)現(xiàn),當(dāng)遭受熱脅迫時(shí),除莖中H2O2含量的升高速率保持一致外,過(guò)表達(dá)株系體內(nèi)的H2O2的含量,POD活性,SOD活性的升高速度較野生型快,;而葉綠素的降低速度較野生型的慢,始終維持在一個(gè)較高的水平。再一次從生理水平上證明了,過(guò)表達(dá)株系的耐熱性比野生型株系的耐熱性好。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：S511

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