本文關(guān)鍵詞：普通小麥TaSEC14p-5基因的克隆及表達分析

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【摘要】：磷脂酰肌醇轉(zhuǎn)運蛋白Sec14是最先在釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中發(fā)現(xiàn)的磷脂酰肌醇轉(zhuǎn)運蛋白,含有一個典型的SEC14保守結(jié)構(gòu)域。Sec14p磷脂酰肌醇轉(zhuǎn)運蛋白廣泛存在于真核生物細胞中,并參與膜運輸途徑、質(zhì)膜發(fā)育、脂肪酸代謝、根毛的生長等生命活動,但未見此蛋白在作物逆境脅迫的有關(guān)報道。為研究Sec14p基因在小麥(Triticum aestivum)發(fā)育及逆境脅迫中的功能,本研究采用電子克隆方法從小麥京花9號中得到一個Sec14p基因,命名為Ta SEC14p-5(Gen Bank登錄號:KU639968)。氨基酸序列分析表明,該基因ORF全長為984 bp,編碼327個氨基酸,相對分子質(zhì)量為37.1 k D,理論等電點為7.70。在植物中該蛋白有典型的SEC14類基因家族保守域SEC14和一個CRAL_TRIO_N結(jié)構(gòu)域。進化和聚類分析表明,小麥Ta SEC14p-5基因與粗山羊草(Aegilops tauschii)磷脂酰肌醇轉(zhuǎn)運蛋白Ae SEC14p基因和水稻(Oryza sativa)磷脂酰肌醇轉(zhuǎn)運蛋白Os02g0200000基因親緣關(guān)系較近,蛋白相似度分別為96.45%和88.38%。采用q RT-PCR技術(shù),對小麥孕穗期不同組織和不同非生物脅迫幼苗進行表達分析。發(fā)現(xiàn)該基因在根、莖、葉、穎殼、雄蕊和種子中均有表達,且在莖中表達量較高,雄蕊次之,根最低;該基因受高鹽的強烈誘導(dǎo),同時也受到脫落酸(abscisic acid,ABA)(200μmol/L)、干旱(PEG6000)和低溫(4℃)不同程度的脅迫誘導(dǎo)。Ta SEC14p-5在Na Cl、ABA、PEG和4℃四種不同脅迫處理下,總體趨勢為先上升后下降。結(jié)果推測,Ta SEC14p-5基因可能參與了Na Cl、ABA、PEG6000和4℃等不同程度的非生物脅迫處理,為進一步改良小麥抗逆性等分子機理研究提供了新的依據(jù)。
【作者單位】： 河北科技師范學院生命科技學院;北京市農(nóng)林科學院雜交小麥工程技術(shù)研究中心;首都師范大學生命科學院;
【基金】：北京市農(nóng)林科學院科技創(chuàng)新能力建設(shè)專項(No.KJCX20140202);北京市農(nóng)林科學院青年基金(No.QNJJ201307) 國家自然科學基金(No.31571744)
【分類號】：S512.1
【正文快照】：

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本文編號：1179115