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豬PPARΓ2基因肌肉超表達(dá)真核表達(dá)載體構(gòu)建以及在轉(zhuǎn)基因小鼠中的功能驗(yàn)證

發(fā)布時(shí)間:2016-09-16 19:22

  本文關(guān)鍵詞:豬PPARΓ2基因肌肉超表達(dá)真核表達(dá)載體構(gòu)建以及在轉(zhuǎn)基因小鼠中的功能驗(yàn)證,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


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豬PPARΓ2基因肌肉超表達(dá)真核表達(dá)載體構(gòu)建以及在轉(zhuǎn)基因小鼠中的功能驗(yàn)證

 

     論文目錄

 

摘要第1-10頁

Abstract第10-13頁

縮略詞表第13-15頁

第一章 文獻(xiàn)綜述第15-34頁

   ·轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究方法與應(yīng)用第15-19頁

     ·轉(zhuǎn)基因動(dòng)物制備方法第15-17頁

     ·轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的應(yīng)用第17-19頁

     ·展望第19頁

   ·肌內(nèi)脂肪候選基因研究第19-27頁

     ·脂肪酸合成酶(Fatty acid synthetase,FAS)第20-21頁

     ·激素敏感脂酶(Hormone-sensitive lipase,HSL)第21頁

     ·脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LPL)第21-22頁

     ·二酯酰甘油;D(zhuǎn)移(diaeylglyeerolaeyltransferas,DGAT)第22-24頁

     ·脂肪酸結(jié)合蛋白(fatty acid binding proteins,FABP)第24-26頁

     ·CD36第26-27頁

   ·PPARγ第27-34頁

     ·PPARγ概述第27-34頁

第二章 pEGFP-N1L-MCK-sPPARγ2真核表達(dá)載體的構(gòu)建第34-53頁

   ·研究目的第34頁

   ·材料與方法第34-36頁

     ·主要儀器設(shè)備第34頁

     ·主要試劑與試劑盒第34-35頁

     ·主要溶液配方第35-36頁

     ·使用主要載體第36頁

   ·實(shí)驗(yàn)方法第36-45頁

     ·pEGFP-N1L-Tyb12載體的構(gòu)建第36-41頁

     ·pEGFP-N1L-sMCK載體的構(gòu)建第41-43頁

     ·最終載體pEGFP-N1L-MCK-PPARγ2的構(gòu)建第43-45頁

   ·實(shí)驗(yàn)結(jié)果第45-51頁

     ·pEGFP-N1L-Tyb12載體的構(gòu)建第45-47頁

     ·載體pEGFP-N1L-sMCK的構(gòu)建第47-48頁

     ·最終載體pEGFP-N1L-MCK-PPARγ2的構(gòu)建第48-51頁

   ·討論第51-53頁

第三章 轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系建立與檢測(cè)第53-67頁

   ·實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡?3頁

   ·實(shí)驗(yàn)材料第53-54頁

     ·實(shí)驗(yàn)動(dòng)物第53頁

     ·儀器設(shè)備第53頁

     ·主要試劑和試劑盒第53-54頁

     ·主要試劑的配制第54頁

   ·實(shí)驗(yàn)方法第54-60頁

     ·豬35日齡胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)建系第54-55頁

     ·質(zhì)粒大量提取第55-56頁

     ·細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)第56-60頁

   ·結(jié)果與分析第60-64頁

     ·成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)第60頁

     ·瞬時(shí)轉(zhuǎn)染豬胚胎成纖維細(xì)胞檢測(cè)和轉(zhuǎn)染C2C12細(xì)胞檢測(cè)第60-62頁

     ·穩(wěn)定轉(zhuǎn)染C2C12細(xì)胞檢測(cè)第62-64頁

   ·討論第64-67頁

     ·關(guān)于成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)第64頁

     ·關(guān)于載體的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)第64-67頁

第四章 轉(zhuǎn)基因小鼠制備與表達(dá)檢測(cè)第67-93頁

   ·實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡?7頁

   ·實(shí)驗(yàn)材料第67-70頁

     ·實(shí)驗(yàn)動(dòng)物第67頁

     ·主要儀器第67頁

     ·主要試劑與試劑盒第67-68頁

     ·主要試劑配方第68-69頁

     ·主要生物學(xué)網(wǎng)站以及分析軟件第69頁

     ·主要引物設(shè)計(jì)第69-70頁

   ·試驗(yàn)方法第70-78頁

     ·轉(zhuǎn)基因小鼠獲取和鑒定第70頁

     ·轉(zhuǎn)基因小鼠PPARγ2的組織表達(dá)檢測(cè)第70-73頁

     ·Western Blot第73-74頁

     ·檢測(cè)PPARγ2上調(diào)對(duì)組織相關(guān)基因表達(dá)的影響分析第74-75頁

     ·轉(zhuǎn)基因小鼠部分生化指標(biāo)測(cè)定第75-78頁

   ·實(shí)驗(yàn)結(jié)果第78-84頁

     ·轉(zhuǎn)基因小鼠F1代檢測(cè)第78頁

     ·轉(zhuǎn)基因小鼠F1代PPARγ2組織表達(dá)檢測(cè)第78-79頁

     ·PPARγ2上調(diào)對(duì)組織相關(guān)基因表達(dá)以及生化指標(biāo)的影響分析第79-82頁

     ·轉(zhuǎn)基因小鼠部分生理生化指標(biāo)測(cè)定第82-84頁

   ·討論第84-93頁

     ·轉(zhuǎn)基因小鼠檢測(cè)第84-86頁

     ·超表達(dá)PPARγ2對(duì)骨骼肌的影響第86-89頁

     ·超表達(dá)PPARγ2對(duì)皮下脂肪的影響第89-91頁

     ·超表達(dá)PPARγ2對(duì)肝臟的影響第91-93頁

第五章 結(jié)論第93-95頁

   ·主要研究成果第93頁

   ·主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)第93-94頁

   ·研究的不足之處第94-95頁

參考文獻(xiàn)第95-113頁

附錄1 載體pEGFP-N1L-MCK-PPARγ2序列第113-117頁

附錄2 引物第117-119頁

在讀期間發(fā)表文章情況第119-120頁

致謝第120-121頁


 

論文編號(hào)BS12426,這篇論文共121頁
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本文編號(hào):116754

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