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嗜水氣單胞菌ATCC7966 luxS基因缺失株構(gòu)建及特性研究

發(fā)布時間:2017-11-01 20:25

  本文關(guān)鍵詞:嗜水氣單胞菌ATCC7966 luxS基因缺失株構(gòu)建及特性研究


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【摘要】:目的研究群體感應(yīng)信號分子AI-2合成酶編碼基因luxS對嗜水氣單胞菌ATCC 7966生理特性及毒力因子的影響。方法利用同源重組原理,構(gòu)建含有中間為卡那霉素抗性基因,兩側(cè)為luxS基因上、下游同源序列片段的基因敲除質(zhì)粒,將構(gòu)建好的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸埃希氏菌SM 10(λpir)感受態(tài)細(xì)胞,利用接合法將質(zhì)粒轉(zhuǎn)入嗜水氣單胞菌ATCC 7966,通過抗性篩選、PCR和DNA測序確認(rèn)嗜水氣單胞菌luxS基因缺失突變株。比較野生株ATCC 7966和luxS基因缺失突變株生長速度、AI-2合成、胞外蛋白酶合成及生物膜形成的差異。結(jié)果嗜水氣單胞菌luxS基因缺失突變株ΔluxS構(gòu)建成功。與野生株相比,突變株生長周期延長,基本喪失合成AI-2和胞外蛋白酶的能力;突變株生物膜形成能力降低,生長24h時生物膜形成能力為野生株的14.5%,36h時生物膜形成能力為野生株的60.0%,突變株生物膜形成速度明顯比野生株緩慢,結(jié)構(gòu)更為疏松。結(jié)論 luxS基因參與調(diào)控嗜水氣單胞菌的生長、AI-2合成和毒力因子表達(dá),本研究為進(jìn)一步研究luxS基因在嗜水氣單胞菌致病性中發(fā)揮的作用奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】: 大連工業(yè)大學(xué)
【關(guān)鍵詞】嗜水氣單胞菌 luxS AI- 胞外蛋白酶 生物膜
【基金】:遼寧省教育廳項(xiàng)目(L2013508) 校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目(DC201502020407)聯(lián)合資助~~
【分類號】:S941.4
【正文快照】: (1.School of Biological Engineering,Dalian Polytechnic University,Dalian116034,China;2.College of Life Science,Dalian Nationalities University,State Ethnic Affairs Commission-Ministry ofEducation Key Laboratory of Biochemical Engineering,Dalian Nationali

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