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過表達TaPK-R1基因增強了小麥對紋枯病的抗性和耐凍性

發(fā)布時間:2017-10-29 03:15

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【摘要】:小麥紋枯病菌(Rhizoctonia cerealis)和倒春寒是小麥生產(chǎn)中重要的生物和非生物脅迫因子,本研究目的是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)改良小麥的紋枯病抗性和耐冷性。利用構(gòu)建的轉(zhuǎn)基因載體pAHC25-MYC-Ta PK-R1,通過基因槍介導法,將小麥AGC蛋白激酶基因TaPK-R1導入春小麥品種揚麥20,獲得TaPK-R1過表達的轉(zhuǎn)基因小麥。對T1至T4代植株進行PCR、RT-PCR、qRT-PCR、Westernblot分析,篩選到3個轉(zhuǎn)基因小麥株系,外源TaPK-R1基因能夠在其植物體內(nèi)遺傳和超量轉(zhuǎn)錄,并翻譯成蛋白質(zhì)。利用致病力不同的R.cerealis菌株R0301和WK207,分別對3個轉(zhuǎn)基因株系T_1至T_2代和T_3至T_4代進行紋枯病抗性鑒定,發(fā)現(xiàn)TaPK-R1過量表達提高了轉(zhuǎn)基因小麥的紋枯病抗性,3個轉(zhuǎn)基因株系各世代的紋枯病平均病級為1.16~2.11,病情指數(shù)為23.20~42.10,而對照揚麥20的紋枯病病級為2.55~3.60,病情指數(shù)為51.00~72.00。用-9℃低溫處理三葉一心期小麥幼苗24 h,對照揚麥20的存活率為17%,3個轉(zhuǎn)基因小麥株系的存活率分別為52%、79%和96%。上述結(jié)果表明,TaPK-R1過量表達能顯著增強小麥對紋枯病的抗性及對凍害的耐受性,所獲得的3個轉(zhuǎn)基因小麥株系可作為潛在的抗源材料。
【作者單位】: 廣西大學農(nóng)學院;中國農(nóng)業(yè)科學院作物科學研究所/農(nóng)作物基因資源與基因改良國家重大科學工程/農(nóng)業(yè)部麥類生物學與遺傳育種重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】小麥 紋枯病 蛋白激酶 TaPK-R 凍害
【基金】:國家自然科學基金項目(31271799)資助~~
【分類號】:S435.121.4
【正文快照】: 本研究由國家自然科學基金項目(31271799)資助。This study was supported by the National Natural Science Foundation of China(31271799).URL:http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1809.S.20160811.0820.008.html紋枯病是我國小麥主產(chǎn)區(qū)的主要土傳病害,由腐生型真菌禾谷絲,

本文編號:1111160

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