本文關(guān)鍵詞：大豆△~1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因GmP5CS1和GmP5CS2的克隆與過(guò)表達(dá)載體構(gòu)建

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【摘要】：利用同源克隆方法從強(qiáng)耐旱栽培大豆(Glycine max)品種齊黃22中克隆得到2個(gè)編碼大豆△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)的基因,分別命名為Gm P5CS1和Gm P5CS2。氨基酸序列分析發(fā)現(xiàn),Gm P5CS1包含1個(gè)長(zhǎng)度為2 163 bp的ORF,編碼720個(gè)氨基酸,等電點(diǎn)p I為6.70,分子量大小為78.38 k Da;Gm P5CS2包含1個(gè)長(zhǎng)度為2 271 bp的ORF,編碼756個(gè)氨基酸,等電點(diǎn)p I為6.10,分子量大小為82.18 k Da。與NCBI公布的部分物種蛋白質(zhì)序列比對(duì)發(fā)現(xiàn),Gm P5CS1與紫花苜蓿(Medicago sativa)的親緣關(guān)系最高,Gm P5CS2與豇豆(Vigna unguiculata)的親緣關(guān)系最高。組織表達(dá)分析表明,Gm P5CS1與Gm P5CS2基因在大豆的各個(gè)組織中均有表達(dá),其中葉和根中的表達(dá)量相對(duì)較高,莖中表達(dá)量次之,花和籽粒中的表達(dá)量相對(duì)較低。利用Gateway技術(shù)得到植物過(guò)表達(dá)載體p Earley Gate103-Gm P5CS,再轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)桿菌EHA105中,為Gm P5CS基因的轉(zhuǎn)化及功能分析奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)大豆研究所/國(guó)家大豆改良中心/農(nóng)業(yè)部大豆生物學(xué)與遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/作物遺傳與種質(zhì)創(chuàng)新國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 大豆 GmPCS基因 Gateway技術(shù)
【基金】：國(guó)家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專項(xiàng)(2014ZX08004) 國(guó)家自然科學(xué)基金(31301340,31301343) 國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-004-PS10) 江蘇省農(nóng)業(yè)科技支撐計(jì)劃(BE2013350) 長(zhǎng)江學(xué)者和創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)發(fā)展計(jì)劃(PCSIRT13073) 江蘇省現(xiàn)代作物生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心(JCIC-MCP)
【分類號(hào)】：S565.1
【正文快照】： 植物在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,經(jīng)常會(huì)受到各種非生物脅迫的影響。非生物脅迫從模式上劃分可以分為兩種:一種是滲透脅迫,通常由干旱、鹽漬和冷害所引起;另一種是氧化脅迫,通常由離子毒害引發(fā)[1]。植物在受到鹽或者干旱等非生物脅迫時(shí),植物細(xì)胞內(nèi)會(huì)迅速合成并積累大量的滲透物質(zhì)如脯氨，

本文編號(hào)：1106853