本文關鍵詞：團頭魴白細胞介素6基因啟動子報告載體的構建及活性分析

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【摘要】：為了解魚類白細胞介素6(IL-6)基因的轉錄調控原理及其免疫作用機制,構建5個團頭魴il-6基因啟動子的熒光素酶報告質粒(PGL3-IL-6P),以PGL3-basic質粒作為陰性對照,將它們分別與內參質粒pRL-TK共轉染進鯉EPC細胞,并用100ng/mL的LPS誘導轉染過重組載體的細胞,24h后檢測熒光素酶的活性。結果顯示:與陰性對照組相比,質粒轉染組PGL3-IL-6P-0、PGL3-IL-6P-1、PGL3-IL-6P-2、PGL3-IL-6P-3與PGL3-IL-6P-4的熒光素酶活性均明顯升高,其中PGL3-IL-6P-4組的熒光素酶活性最高,表明該啟動子缺失體(-379至+34)包含il-6的核心啟動子。用LPS刺激轉染過重組載體的細胞后發(fā)現(xiàn),與未經(jīng)LPS刺激的對照組相比,僅PGL3-IL-6P-4組的活性明顯增強,而其余缺失體的活性則沒有顯著變化,這進一步表明PGL3-IL-6P-4缺失體包含核心啟動子區(qū),并推測該核心啟動子區(qū)域存在的潛在轉錄因子NF-κB與C/EBPβ等可能是響應LPS刺激的重要作用元件。
【作者單位】： 華中農(nóng)業(yè)大學水產(chǎn)學院/農(nóng)業(yè)部淡水生物繁育重點實驗室;淡水水產(chǎn)健康養(yǎng)殖湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心;西北農(nóng)林科技大學動物科技學院;
【關鍵詞】： 團頭魴 白細胞介素 熒光素酶報告質粒 啟動子活性 LPS
【基金】：國家自然科學基金項目(31572613) 國家科技支撐計劃(2012BAD26B00) 中央高�；究蒲袠I(yè)務費專項(2014PY042和2662015PY134)
【分類號】：S917.4
【正文快照】： 白細胞介素6(IL-6)是一種多功能細胞因子,在調控動物免疫應答反應、急性期蛋白的合成和造血功能等方面具有非常重要的作用。許多細胞,如活化的T/B淋巴細胞、單核-巨噬細胞、血管內皮細胞、腫瘤細胞、肝細胞、造血干細胞、神經(jīng)細胞等[1-2]都可以產(chǎn)生IL-6。正常狀態(tài)下,動物血漿

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【相似文獻】

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本文編號：1106286