本文關(guān)鍵詞：團(tuán)頭魴白細(xì)胞介素6基因啟動(dòng)子報(bào)告載體的構(gòu)建及活性分析

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【摘要】：為了解魚類白細(xì)胞介素6(IL-6)基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控原理及其免疫作用機(jī)制,構(gòu)建5個(gè)團(tuán)頭魴il-6基因啟動(dòng)子的熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒(PGL3-IL-6P),以PGL3-basic質(zhì)粒作為陰性對(duì)照,將它們分別與內(nèi)參質(zhì)粒pRL-TK共轉(zhuǎn)染進(jìn)鯉EPC細(xì)胞,并用100ng/mL的LPS誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染過重組載體的細(xì)胞,24h后檢測(cè)熒光素酶的活性。結(jié)果顯示:與陰性對(duì)照組相比,質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組PGL3-IL-6P-0、PGL3-IL-6P-1、PGL3-IL-6P-2、PGL3-IL-6P-3與PGL3-IL-6P-4的熒光素酶活性均明顯升高,其中PGL3-IL-6P-4組的熒光素酶活性最高,表明該啟動(dòng)子缺失體(-379至+34)包含il-6的核心啟動(dòng)子。用LPS刺激轉(zhuǎn)染過重組載體的細(xì)胞后發(fā)現(xiàn),與未經(jīng)LPS刺激的對(duì)照組相比,僅PGL3-IL-6P-4組的活性明顯增強(qiáng),而其余缺失體的活性則沒有顯著變化,這進(jìn)一步表明PGL3-IL-6P-4缺失體包含核心啟動(dòng)子區(qū),并推測(cè)該核心啟動(dòng)子區(qū)域存在的潛在轉(zhuǎn)錄因子NF-κB與C/EBPβ等可能是響應(yīng)LPS刺激的重要作用元件。
【作者單位】： 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院/農(nóng)業(yè)部淡水生物繁育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;淡水水產(chǎn)健康養(yǎng)殖湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心;西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 團(tuán)頭魴 白細(xì)胞介素 熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒 啟動(dòng)子活性 LPS
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31572613) 國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2012BAD26B00) 中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(2014PY042和2662015PY134)
【分類號(hào)】：S917.4
【正文快照】： 白細(xì)胞介素6(IL-6)是一種多功能細(xì)胞因子,在調(diào)控動(dòng)物免疫應(yīng)答反應(yīng)、急性期蛋白的合成和造血功能等方面具有非常重要的作用。許多細(xì)胞,如活化的T/B淋巴細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、肝細(xì)胞、造血干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等[1-2]都可以產(chǎn)生IL-6。正常狀態(tài)下,動(dòng)物血漿

【參考文獻(xiàn)】

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2 張涓;陳思思;何玉慧;黃金海;劉小玲;陳孝煊;袁改玲;;團(tuán)頭魴β-防御素1基因cDNA的克隆、序列分析及表達(dá)特征[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2015年03期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 曾聰;曹小娟;高澤霞;羅偉;錢雪橋;王衛(wèi)民;;團(tuán)頭魴生長(zhǎng)性狀的遺傳力和育種值估計(jì)[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年02期

2 曾聰;張耀;曹小娟;羅偉;劉肖蓮;高澤霞;錢雪橋;王衛(wèi)民;;團(tuán)頭魴3個(gè)地理種群雜交效果的配合力和微衛(wèi)星標(biāo)記預(yù)測(cè)[J];水產(chǎn)學(xué)報(bào);2012年06期

3 易少奎;高澤霞;羅偉;段曉克;李艷和;王衛(wèi)民;;團(tuán)頭魴EST-SSR在厚頜魴中的跨種擴(kuò)增及雜交F_1的鑒定[J];水產(chǎn)學(xué)報(bào);2013年07期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

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3 杜睿;基于形態(tài)學(xué)和微衛(wèi)星標(biāo)記的魴屬魚類種間及子代的鑒定[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 陳婷婷;團(tuán)頭魴源嗜水氣單胞菌流行病調(diào)查及致病性、耐藥性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

5 胥輝;團(tuán)頭魴池塘養(yǎng)殖模式與養(yǎng)殖效益分析[D];蘇州大學(xué);2013年

6 陳麗萍;饑餓再投喂對(duì)團(tuán)頭魴幼魚生肌調(diào)節(jié)因子表達(dá)和肌肉特性的影響[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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1 韋新蘭;張杰;陳麗萍;王衛(wèi)民;高澤霞;王煥嶺;;團(tuán)頭魴SPATA4基因的分子克隆及表達(dá)分析[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2013年03期

2 蘇利娜;丁祝進(jìn);李鴻;周鳳娟;王衛(wèi)民;劉紅;;團(tuán)頭魴Dmrt4基因的克隆與表達(dá)分析[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2013年06期

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【相似文獻(xiàn)】

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1 林帆;劉清華;李軍;隋娟;肖志忠;徐世宏;馬道遠(yuǎn);肖永雙;;真鯛(Pagrus major)vasa基因5′端啟動(dòng)子克隆及表達(dá)載體構(gòu)建[J];海洋與湖沼;2011年02期

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 田麗芳;集胞藻6803中ndhK基因啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)與功能的初步分析[D];上海師范大學(xué);2013年

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本文編號(hào)：1106286