陸地棉鹽脅迫應(yīng)答基因GhWRKY41的克隆與分析
發(fā)布時間:2017-10-27 18:10
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【摘要】:為研究轉(zhuǎn)錄因子GhWRKY41在陸地棉鹽脅迫應(yīng)答過程中的作用,基于差減文庫分析結(jié)果,利用RT-PCR和RACE技術(shù),克隆了GhWRKY41基因(GenBank登錄號為HM002635)。該基因cDNA長度為1 630bp,含有ORF(Open reading frame)為1 068bp,編碼355個氨基酸的多肽,包含2個內(nèi)含子。通過瞬時表達(dá)分析亞細(xì)胞定位,結(jié)果表明,轉(zhuǎn)錄因子GhWRKY41定位于細(xì)胞核,符合轉(zhuǎn)錄因子特性。轉(zhuǎn)基因株系發(fā)芽試驗結(jié)果表明,過量表達(dá)GhWRKY41基因,可顯著提高轉(zhuǎn)基因棉花在干旱、鹽和低溫脅迫下的發(fā)芽率;利用Real-time PCR技術(shù),證明在鹽和干旱脅迫條件下,轉(zhuǎn)基因株系中GhWRKY41基因的表達(dá)量顯著上升。GhWRKY41基因在根、莖和葉片中表達(dá)存在差異,根系中脅迫6h上調(diào)達(dá)到最高,莖中則脅迫48h達(dá)到最高,而葉片中僅6和24h上調(diào)表達(dá)。進(jìn)一步比較轉(zhuǎn)基因棉花與野生型棉花的纖維品質(zhì)性狀,結(jié)果表明GhWRKY41的過表達(dá)可以提高轉(zhuǎn)基因棉花的衣分。因此,GhWRKY41參與了棉花響應(yīng)鹽和干旱脅迫應(yīng)答過程,且過表達(dá)可提高轉(zhuǎn)基因棉花耐鹽性和耐旱性。
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院/雜種優(yōu)勢研究與利用教育部重點實驗室/作物遺傳改良北京市重點實驗室;湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所;
【關(guān)鍵詞】: 陸地棉 GhWRKY 鹽脅迫 表達(dá)分析 發(fā)芽率
【基金】:國家轉(zhuǎn)基因重大專項(2014ZX08005-004,2014ZX08005-004B) 國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)重大項目(2006AA10A108)
【分類號】:S562
【正文快照】: 土壤鹽害嚴(yán)重影響植物生長發(fā)育以及產(chǎn)量形成,甚至影響植物存活[1-4]。水資源匱乏、不合理灌溉以及環(huán)境條件的不斷惡化,擴(kuò)大了土壤鹽漬化面積[5-6]。土壤鹽漬化已經(jīng)成為了關(guān)聯(lián)資源、環(huán)境等問題的世界性難題[7-8]?寺←}脅迫應(yīng)答基因,提高作物耐鹽性、減輕鹽害已經(jīng)成為當(dāng)前研究,
本文編號:1104602
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