hns基因?qū)Υ竽c埃希菌生物膜形成能力的影響
本文關(guān)鍵詞:hns基因?qū)Υ竽c埃希菌生物膜形成能力的影響
更多相關(guān)文章: 大腸埃希菌 生物膜 胞外多糖 hns基因 基因敲除
【摘要】:目的建立大腸埃希菌Red重組系統(tǒng)無痕敲除方法,探討hns基因?qū)Υ竽c埃希菌生物膜形成能力的影響。方法以大腸埃希菌MG1655為研究對象,將p KD46質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入MG1655感受態(tài)細(xì)胞。以質(zhì)粒p KD3為模板擴(kuò)增氯霉素抗性基因片段,并將其轉(zhuǎn)化入MG1655/p KD46,氯霉素抗性平板篩選陽性克隆。利用p CP20質(zhì)粒刪除氯霉素抗性基因,構(gòu)建MG1655 hns基因缺失菌株。96孔板結(jié)晶紫染色法分析MG1655 hns基因缺失株生物膜形成能力的變化。苯酚-硫酸法檢測細(xì)菌胞外多糖含量。結(jié)果氯霉素抗性基因消除后的hns基因缺失株P(guān)CR產(chǎn)物長度為434 bp,測序鑒定正確,成功構(gòu)建MG1655△hns基因缺失株。MG1655△hns菌株生物膜形成能力和胞外多糖產(chǎn)生顯著低于MG1655(P0.01)。結(jié)論利用Red重組技術(shù)成功構(gòu)建出MG1655△hns菌株,hns基因?qū)?xì)菌生物膜的形成具有重要的調(diào)控作用。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院藥劑科;
【關(guān)鍵詞】: 大腸埃希菌 生物膜 胞外多糖 hns基因 基因敲除
【基金】:國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金(81301397)~~
【分類號】:R446.5
【正文快照】: 大腸埃希菌(Escherichia coli,E.coli)是臨床分離率最高的革蘭陰性菌,在醫(yī)院獲得性及社區(qū)獲得性感染中較為常見。形成生物膜的大腸埃希菌可以逃避抗菌藥物和宿主免疫系統(tǒng)的攻擊,具有高度的耐藥性,并可在生物膜解離后導(dǎo)致新的感染,這一過程使感染趨于慢性化且難于控制[1-2]。H-
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5 吳,
本文編號:1097772
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