本文關(guān)鍵詞：IGFALS基因多態(tài)性與特發(fā)性矮小的關(guān)系

  更多相關(guān)文章： 矮小IGFALS基因 胰島素樣生長因子 胰島素抵抗 單核苷酸多態(tài)性

【摘要】：目的:探討胰島素樣生長因子酸不穩(wěn)定亞單位(IGFALS)基因多態(tài)性與中國兒童漢族人群特發(fā)性矮小相關(guān)性以及胰島素抵抗的關(guān)系。方法:采用病例-對照研究方法,選取2014年8月至2015年8月在天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院兒科內(nèi)分泌門診因身材矮小就診的患兒,其中診斷為特發(fā)性矮小的129例患兒納入本研究,男孩69例,女孩60例,年齡為3歲~14歲9月,平均年齡為8歲10月,均符合特發(fā)性矮小診斷標(biāo)準。對照組為來自我院同科同期身高正常的兒童131例。男孩72例,女孩59例,年齡3歲6月~13歲9月,平均年齡為8歲11月。所有研究者均需要空腹取外周靜脈血,提取全基因組DNA,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)聯(lián)合直接基因測序技術(shù)對研究對象IGFALS基因外顯子2進行測序,查找IGFALS外顯子2這段基因存在的基因多態(tài)性。比較特發(fā)性矮小組和正常對照組IGFALS外顯子2基因變化頻率有無差異。再根據(jù)測序結(jié)果,按照樣本含同義等位基因變化數(shù)將特發(fā)性矮小組進行分組,分為無等位基因變化組、一個等位基因變化組、兩個等位基因變化組、三個等位基因變化組,以此類推,對各組臨床指標(biāo)(身高、體重、BMI)以及生化指標(biāo)(胰島素樣生長因子-1、胰島素樣結(jié)合蛋白3、空腹血糖、空腹胰島素、胰島素抵抗指數(shù))進行相關(guān)分析;將有意義的基因變化假設(shè)為病理性基因變化組,無意義的基因變化假設(shè)為良性基因變化組,同樣對兩組進行上述指標(biāo)的分析;分別采用單因素方差分析、t檢驗、c2檢驗進行統(tǒng)計學(xué)分析。P0.05為結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)差異;統(tǒng)計均在SPSS20.0軟件下完成。結(jié)果:1.在矮小組和對照組中共同發(fā)現(xiàn)8個頻率較高的單核苷酸多態(tài)性,其中同義突變包括:D70D、A11A、A267A、Y462Y、T522T、A475A,非同義突變包括:E198V、L97F;除此之外,在7個ISS兒童中還發(fā)現(xiàn)5個不同IGFALS基因變化,均為非同義突變——單個堿基改變導(dǎo)致編碼氨基酸變化(R548W、P307L、A117V、H314R、R306Q),同時在對照組兒童中也發(fā)現(xiàn)1個非同義突變(S410L)。發(fā)現(xiàn)IGFALS基因多態(tài)性同義突變的頻率在矮小組和對照組之間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(19.5%vs 18.4%,c2=0.286,p=0.319)。而矮小組非同義突變發(fā)生率較對照組高,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(17.1%vs 9.2%,c2=3.563,p=0.044)。2.ISS組IGFALS外顯子2基因A11A、D70D、L97F、E198V、A267A、Y462Y、A475A、T522T分布均符合Harder-Weinberg平衡(均p0.05)。3.三個等位基因變化組的身高SDS、IGF-1SDS低于其他三組,具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=3.340,p=0.022;F=3.769,p=0.014),空腹胰島素、胰島素抵抗指數(shù)高于其他三組,具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=6.682,p=0.000;F=5.888,p=0.001);無等位變化基因組、一個等位基因變化組、兩個等位基因變化組之間身高SDS、IGF-1SDS、空腹胰島素、胰島素抵抗指數(shù)之間無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。4.病理性等位基因變化組身高SDS、IGF-1SDS低于良性等位基因變化組,且具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.400,p=0.018;t=2.242,p=0.027)。而病理性等位基因變化組空腹胰島素、胰島素抵抗指數(shù)高于良性等位基因變化組,具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.775,p=0.000;t=3.556,p=0.001)。結(jié)論1.IGFALS基因非同義突變可能是特發(fā)性矮小生長障礙的原因之一。2.推測部分特發(fā)性矮小兒童的胰島素抵抗及IGF-1水平低可能與IGFALS基因變化有關(guān)。3.ISS組IGFALS基因存在兩個等位基因變化組、一個等位基因變化組與無等位基因變化組身高SDS、IGF-1SDS、IGFBP3SDS、血糖、胰島素、胰島素抵抗指數(shù)差別無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);提示IGFALS基因三個以下的同義等位基因變化(本文發(fā)現(xiàn)的)可能與矮小無關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：矮小IGFALS基因 胰島素樣生長因子 胰島素抵抗 單核苷酸多態(tài)性
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R725.8
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-12
• 前言12-19
• 研究現(xiàn)狀、成果12-18
• 研究目的和方法18-19
• 1. 對象和方法19-29
• 1.1 研究對象19-20
• 1.2 數(shù)據(jù)預(yù)處理20
• 1.3 IGF-1、IGFBP3、血糖和胰島素的測定20
• 1.4 實驗主要儀器和試劑20-21
• 1.4.1 主要儀器20-21
• 1.4.2 實驗試劑21
• 1.5 標(biāo)本的采集和處理21-22
• 1.6 全血基因組DNA提取22-23
• 1.6.1 原理簡介22
• 1.6.2 操作步驟22-23
• 1.7 基因組DNA鑒定23
• 1.8 PCR方法23-26
• 1.8.1 PCR實驗原理23-24
• 1.8.2 合成引物24-25
• 1.8.3 PCR擴增25-26
• 1.9 瓊脂糖凝膠電泳判斷PCR產(chǎn)物26-27
• 1.10 PCR產(chǎn)物直接測序及測序圖分析27
• 1.10.1 PCR產(chǎn)物直接測序27
• 1.10.2 測序圖分析27
• 1.11 統(tǒng)計學(xué)分析27-29
• 2 結(jié)果29-40
• 2.1 DNA質(zhì)量鑒定29
• 2.2 PCR擴增產(chǎn)物的鑒定29-30
• 2.3 DNA直接測序結(jié)果30-35
• 2.4 統(tǒng)計結(jié)果35-40
• 2.4.1 矮小組和正常對照組IGFALS基因的變化35-36
• 2.4.2 ISS組IGFALS基因變化分布的Harder-Weinberg檢驗36-37
• 2.4.3 ISS組IGFALS基因多態(tài)性變化與IGF-1、IGFBP3、血糖、胰島素水平、胰島素抵抗的關(guān)系37-40
• 3.討論40-44
• 結(jié)論44-45
• 研究不足及展望45-46
• 參考文獻46-52
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明52-53
• 綜述 酸不穩(wěn)定性亞單位基因突變對生長發(fā)育的影響53-62
• 綜述參考文獻59-62
• 致謝62-64
• 個人簡歷64

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李貴林;牛麗莉;劉海峰;郭家中;;哺乳動物胰島素樣生長因子酸不穩(wěn)定亞基的結(jié)構(gòu)與功能[J];遺傳;2015年12期

，

本文編號：1093919