本文關(guān)鍵詞：節(jié)瓜抗鐮刀菌酸突變體內(nèi)切幾丁質(zhì)酶基因的克隆與植物表達載體構(gòu)建

  更多相關(guān)文章： 節(jié)瓜 抗鐮刀菌酸突變體 內(nèi)切幾丁質(zhì)酶基因 c DNA克隆 植物表達載體

【摘要】：根據(jù)節(jié)瓜與枯萎病菌互作構(gòu)建抑制消減文庫獲得的內(nèi)切幾丁質(zhì)酶基因EST序列,以節(jié)瓜抗鐮刀菌酸突變體"LT3"為試材,通過RT-PCR與RACE相結(jié)合的方法,獲得了該基因全長c DNA序列,命名為Cq Chi I。序列測定和生物信息學(xué)分析結(jié)果表明,該基因c DNA序列全長1 139 bp,編碼區(qū)在38~982 bp之間,編碼314個氨基酸,蛋白質(zhì)分子量為33.94 ku,等電點為8.43,具有chitinase_gluco_hydro_19及l(fā)ysozome_like superfamily功能域,推測該蛋白可能兼具幾丁質(zhì)酶與溶菌酶活性。結(jié)構(gòu)分析表明,該蛋白二級結(jié)構(gòu)中α螺旋、延伸鏈、β轉(zhuǎn)角與無規(guī)則卷曲分別占24.20%、18.15%、7.96%和49.68%,該蛋白為親水性非跨膜蛋白,1~23氨基酸預(yù)測為信號肽。其三級結(jié)構(gòu)高度保守,為class I堿性幾丁質(zhì)酶,屬于幾丁質(zhì)酶第19家族,為分泌細(xì)胞外蛋白。序列比對與系統(tǒng)進化分析結(jié)果顯示,Cq Chi I與黃瓜、甜瓜、葫蘆、苦瓜等植物幾丁質(zhì)酶基因親緣關(guān)系緊密,與黃瓜堿性內(nèi)切幾丁質(zhì)酶(XP004134833)相似性最高為85%。進一步構(gòu)建了植物表達載體p Cambia1300并轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌EHA105,通過蘸花法轉(zhuǎn)化擬南芥,為后續(xù)開展基因功能研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所;
【關(guān)鍵詞】： 節(jié)瓜 抗鐮刀菌酸突變體 內(nèi)切幾丁質(zhì)酶基因 c DNA克隆 植物表達載體
【基金】：國家自然科學(xué)青年基金(No.31311643) 廣東省自然科學(xué)基金(No.10451064001006063) 廣州市珠江科技新星項目(No.2013086)
【分類號】：S436.429
【正文快照】： 節(jié)瓜枯萎病是限制節(jié)瓜(Benincasa hispida Cogn.var.Chieh-qua How)生產(chǎn)的最重要因子之一,該病害由鐮刀菌節(jié)瓜�；�(Fusarium oxyrum sp.Chieh-qua)引起,整個生育期均可發(fā)病,發(fā)病植株葉片變黃萎蔫至整株枯死。華南地區(qū)節(jié)瓜枯萎病田間發(fā)病率通常為30%左右,嚴(yán)重時可達70%以上,

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李驥,劉進元;一個新型的棉花幾丁質(zhì)酶基因(英文)[J];Acta Botanica Sinica;2003年12期

2 梅利;朱振宇;劉永翔;朱國勝;劉作易;;玫煙色棒束孢幾丁質(zhì)酶基因部分序列的克隆及分析[J];貴州農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年03期

3 胡春華;魏岳榮;劉凱;易干軍;黃秉智;黃永紅;;幾丁質(zhì)酶基因克隆及其野生蕉轉(zhuǎn)化[J];分子植物育種;2010年04期

4 陸瑞菊,黃劍華,王亦菲,孫月芳,周潤梅;幾丁質(zhì)酶基因在番茄上的轉(zhuǎn)化[J];上海農(nóng)業(yè)學(xué)報;2000年04期

5 任春梅,高必達,張學(xué)文,何迎春,蘇建明;細(xì)菌幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)化番茄的研究[J];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2002年04期

6 咸洪泉;湯偉;李安娜;李多川;;菌寄生真菌黃藍(lán)狀菌(Talaromyces flavus)幾丁質(zhì)酶基因的克隆與生物信息學(xué)分析[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報;2011年06期

7 謝映忠,方向平,譚兆平,張宏,梁張慧,林錦英;幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)化番茄的研究[J];廣東農(nóng)業(yè)科學(xué);2003年05期

8 咸洪泉;湯偉;張麗青;李安娜;李多川;;黃藍(lán)狀菌幾丁質(zhì)酶基因tfchi1的克隆、表達及抗菌活性[J];植物病理學(xué)報;2012年02期

9 湯強;劉玉軍;方玲;李增智;黃勃;;玫煙色棒束孢幾丁質(zhì)酶基因上游調(diào)控序列克隆與結(jié)構(gòu)預(yù)測分析[J];熱帶作物學(xué)報;2012年01期

10 張兵新;楊星勇;郭濤;閆文慧;申鴻;;接種木霉和大麗輪枝菌對轉(zhuǎn)幾丁質(zhì)酶基因煙草防御酶和養(yǎng)分含量的影響[J];西南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2014年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉菊華;徐碧玉;張靜;張建斌;賈彩紅;金志強;;香蕉內(nèi)切幾丁質(zhì)酶基因的表達及其與果實成熟的關(guān)系[A];中國園藝學(xué)會2010年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2010年

2 李寶健;許新萍;馮道榮;范欽;朱華晨;林莉;賀竹梅;劉秋云;;論改良生物體遺傳性的多基因策略——Ⅱ.多基因改良策略的應(yīng)用前景及存在問題[A];中國生物工程學(xué)會第三次全國會員代表大會暨學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2001年

3 胡春華;魏岳榮;易干軍;黃永紅;盛鷗;;幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)化夫人指蕉的研究[A];中國園藝學(xué)會2012年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2012年

4 唐文華;王益民;程愛麗;;幾丁質(zhì)酶基因克隆與轉(zhuǎn)化[A];全國生物防治學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];1995年

5 齊放軍;季志英;劉相梅;劉纓;何晨陽;;粘質(zhì)沙雷氏菌幾丁質(zhì)酶基因的克隆、序列測定及結(jié)構(gòu)域分析[A];中國植物病理學(xué)會2004年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2004年

6 何迎春;高必達;;含粘質(zhì)沙雷氏菌幾丁質(zhì)酶chiA基因的植物轉(zhuǎn)化質(zhì)粒pBG1112的構(gòu)建和檢驗[A];中國植物病理學(xué)會第七屆代表大會暨學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2002年

7 張志忠;吳菁華;呂柳新;何承坤;黃碧琦;;番茄幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)化西瓜研究初報[A];蔬菜分子育種研討會論文集[C];2004年

8 韓明臣;馮蓮榮;王占斌;;綠色木霉(Trichoderma viride Pers．ex Fr．)幾丁質(zhì)酶基因克隆[A];中國植物病理學(xué)會2007年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2007年

9 石磊;周紅妹;郭慶港;李社增;馬平;;萎縮芽孢桿菌CAB一1菌株中幾丁質(zhì)酶基因的克隆及原核表達[A];植�？萍紕�(chuàng)新與病蟲防控專業(yè)化——中國植物保護學(xué)會2011年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2011年

10 朱新霞;高劍峰;田麗萍;祝建波;;小擬南芥幾丁質(zhì)酶基因的克隆、序列分析及原核表達[A];第二屆中國甘草學(xué)術(shù)研討會暨第二屆新疆植物資源開發(fā)、利用與保護學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2004年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 咸洪泉;菌寄生真菌幾丁質(zhì)酶基因的克隆及功能研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

2 樊東;幾種鱗翅目昆蟲幾丁質(zhì)酶基因的克隆與表達研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

3 劉占良;拮抗鏈霉菌Men-myco-93-63分類學(xué)鑒定及其幾丁質(zhì)酶基因研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

4 劉力強;玫瑰黃鏈霉菌幾丁質(zhì)酶基因及抗生素合成基因簇研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

5 時焦;幾丁質(zhì)酶基因在煙草中表達及對真菌病害的抗性研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

6 張海燕;角毛殼菌表達序列標(biāo)簽測定及幾丁質(zhì)酶基因的克隆與表達[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李大琪;飛蝗幾丁質(zhì)酶基因的功能研究[D];山西大學(xué);2011年

2 徐恩靜;小麥幾丁質(zhì)酶基因的檢測及酶活性測定[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

3 劉平;利用疏綿狀嗜熱絲孢菌幾丁質(zhì)酶基因提高水稻抗病性的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 孫炳欣;人參CLASSⅢ幾丁質(zhì)酶基因克隆、序列分析及原核表達[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

5 劉海泉;嗜熱毛殼菌熱穩(wěn)定幾丁質(zhì)酶基因的克隆、表達與性質(zhì)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

6 王金芳;萊氏野村菌Nomuraea rileyi幾丁質(zhì)酶基因的克隆、表達與分析[D];西南大學(xué);2009年

7 孫紅星;綠色木霉LTR-2 42kDa幾丁質(zhì)酶基因的克隆及轉(zhuǎn)基因番茄的構(gòu)建[D];山東理工大學(xué);2008年

8 趙健;HaSNPV幾丁質(zhì)酶基因原核表達、純化與復(fù)性的研究[D];西北大學(xué);2006年

9 李曉東;HaSNPV幾丁質(zhì)酶基因原核與真核的構(gòu)建及表達研究[D];西北大學(xué);2007年

10 朱振宇;哈茨木霉幾丁質(zhì)酶基因的克隆及其在畢赤酵母中的表達[D];貴州大學(xué);2009年

，

本文編號：1091391