本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)lpaat和gpd1基因工程藻的快速篩選

  更多相關(guān)文章： 基因工程 轉(zhuǎn)基因藻 萊茵衣藻 lpaat基因 gpd基因 三酰甘油合成

【摘要】：根據(jù)萊茵衣藻密碼子偏好性對源于油菜的溶血磷脂酸�；D(zhuǎn)移酶基因(lpaat)和酵母的甘油3-磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶基因(gpd1)進(jìn)行優(yōu)化,獲得適合萊茵衣藻表達(dá)的c-lpaat和c-gpd1基因,將其連接到p H124質(zhì)粒中,構(gòu)建相應(yīng)的衣藻表達(dá)載體.通過珠磨法進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,經(jīng)Zeomycin抗性篩選和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)驗(yàn)證,獲得導(dǎo)入c-lpaat和c-gpd1的轉(zhuǎn)基因藻.利用半定量反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)技術(shù)篩選高效表達(dá)c-lpaat和c-gpd1的轉(zhuǎn)基因藻,目的基因的轉(zhuǎn)錄水平分別提高了56.38%和75.95%,其藻細(xì)胞的脂肪酸含量也得到相應(yīng)增加,與基因表達(dá)情況一致.證明萊茵衣藻可以有效表達(dá)外源高等植物的基因,利用半定量RT-PCR可以快速篩選出潛在的高油脂含量轉(zhuǎn)基因工程藻株.
【作者單位】： 深圳大學(xué)生命與海洋科學(xué)學(xué)院深圳市海洋生物資源與生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 基因工程 轉(zhuǎn)基因藻 萊茵衣藻 lpaat基因 gpd基因 三酰甘油合成
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31470389;31470431)~~
【分類號】：Q943.2
【正文快照】： Received:2015-06-15;Accepted:2015-11-16Foundation:National Natural Science Foundation of China(31470389,31470431)錛Corresponding author:Professor Hu Zhangli.E-mail:huzl@szu.edu.cnCitation:Wang Chaogang,Li Yi,and Hu Zhangli.Rapid screening of the transgen

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 胡章立;李建成;程雪薇;;萊茵衣藻線粒體遺傳系統(tǒng)及其外源基因表達(dá)[J];深圳大學(xué)學(xué)報(bào)(理工版);2013年06期

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 ;Expression and molecular analysis of phbB gene in Chlamydomonas reinhardtii[J];Chinese Science Bulletin;2004年16期

2 李建成;彭世清;胡章立;;SEC2在萊茵衣藻中的表達(dá)及免疫學(xué)活性分析[J];深圳大學(xué)學(xué)報(bào)(理工版);2012年02期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王潮崗,胡章立;萊茵衣藻細(xì)胞核轉(zhuǎn)化系統(tǒng)研究進(jìn)展[J];仲愷農(nóng)業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年02期

2 胡章立;王潮崗;吳錦霞;;增強(qiáng)型綠色熒光蛋白在萊茵衣藻中的高效表達(dá)[J];深圳特區(qū)科技;2005年00期

3 蔣雯婷;王全喜;吳雙秀;;鹽脅迫狀態(tài)下萊茵衣藻849光合特性的初步研究[J];植物研究;2007年03期

4 黃非;黃秦;黃敏;易秀麗;鄭紅波;喬代蓉;曹毅;;萊茵衣藻玻璃珠法快速轉(zhuǎn)化檢測體系的建立[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年03期

5 吳文凱;劉成前;周志剛;盧山;;用于萊茵衣藻熒光定量PCR分析的內(nèi)參基因選擇[J];植物生理學(xué)通訊;2009年07期

6 董志芳;艾山江·阿布都拉;阿布力孜·.阿布力米提;圖爾遜·買買提;吾甫爾·米吉提;;金屬離子抗性衣藻品系的分離篩選及其鑒定[J];武漢植物學(xué)研究;2010年01期

7 王榮榮;閻光宇;王全喜;吳雙秀;劉曉磊;;外源葡萄糖對萊茵衣藻生長和產(chǎn)氫的影響[J];植物研究;2010年03期

8 秦瑯;朱毅;;萊氏衣藻鞭毛研究進(jìn)展[J];首都師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年01期

9 齊雨藻;鄧春匡;;衣藻和水綿[J];生物學(xué)通報(bào);1958年06期

10 鄭朝峰,孫惠珍,湯玉瑋;衣藻培養(yǎng)及其硝酸還原酶活力的測定[J];微生物學(xué)通報(bào);1989年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳閱增;張惟杰;李蔭蓁;;幾種元素對衣藻和酵母生長的影響[A];中國營養(yǎng)學(xué)會首屆微量元素專題討論會論文摘要匯編[C];1985年

2 吾甫爾·米吉提;艾山江;徐琴;艾爾肯·熱合蔓;A．S．Chunaev;;萊茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)中葉綠素b生成的遺傳研究進(jìn)展[A];第二屆中國青年學(xué)者微生物遺傳學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2006年

3 潘俊敏;;模式生物衣藻細(xì)胞微管解聚的分子機(jī)制[A];2009中國植物學(xué)會植物細(xì)胞生物學(xué)學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2009年

4 左照江;李洪濤;朱曄榮;白艷玲;王勇;;酸脅迫對萊茵衣藻保護(hù)酶活性的影響[A];植物分子生物學(xué)與現(xiàn)代農(nóng)業(yè)——全國植物生物學(xué)研討會論文摘要集[C];2010年

5 吳志華;黎雙飛;胡章立;;萊茵衣藻線粒體外源基因表達(dá)系統(tǒng)的初步研究[A];廣東省植物學(xué)會第十七期學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

6 陳俊;吳錦霞;胡章立;;表達(dá)人組織激肽釋放酶基因萊茵衣藻的構(gòu)建與功能研究[A];廣東省植物學(xué)會第十九期學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

7 劉曉磊;閻光宇;王全喜;吳雙秀;;萊茵衣藻外源基因轉(zhuǎn)化和表達(dá)的研究[A];節(jié)能環(huán)保 和諧發(fā)展——2007中國科協(xié)年會論文集（一）[C];2007年

8 蘭利瓊;卿人韋;吳巧玉;周密;劉翔;劉佳;劉萍;耿曉娟;傅華龍;;沙角衣藻的抗菌活性研究[A];中國海洋湖沼學(xué)會藻類學(xué)分會第七屆會員大會暨第十四次學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2007年

9 張玉蘭;;衣藻視紫紅質(zhì)的位置及其在細(xì)胞分裂周期中的動(dòng)態(tài)變化[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會第七次會議論文摘要匯編[C];1999年

10 徐田枚;張洪濤;吾甫爾·米吉提;艾爾肯·熱合蔓;A．S．Chunaev;;萊茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)pds基因突變株的突變性質(zhì)分析[A];第二屆中國青年學(xué)者微生物遺傳學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 劉晨臨;日本凋毛藻表達(dá)序列標(biāo)記及南極衣藻分子系統(tǒng)學(xué)研究[D];中國海洋大學(xué);2004年

2 陳杏洲;衣藻葉綠體表達(dá)系統(tǒng)的改造和應(yīng)用及木聚糖酶工程菌的發(fā)酵研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

3 王亮;CrKin13在衣藻鞭毛組裝與解聚中功能和機(jī)制的研究[D];清華大學(xué);2013年

4 許麗麗;萊茵衣藻與根瘤菌共培養(yǎng)提高產(chǎn)氫及其生理生態(tài)學(xué)機(jī)理[D];華東師范大學(xué);2014年

5 張麗萍;NO與CO調(diào)節(jié)萊茵衣藻銅鐵脅迫[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

6 丁q，

本文編號：1087219