本文關(guān)鍵詞：Mir-132-3p靶向下調(diào)SOX4基因抑制肝癌細胞增殖、遷移侵襲的實驗研究

  更多相關(guān)文章： hepG2 mir-132-3p SOX4 細胞增殖 侵襲

【摘要】：目的:探討mir-132-3p是否靶向調(diào)控SOX4基因(sex-determining region Y-box 4)抑制肝癌細胞增殖、遷移侵襲。方法:將hep G2細胞進行實驗分組:正常對照組不接受任何處理;mimics對照轉(zhuǎn)染組;hsa-mir-132 mimics實驗轉(zhuǎn)染組。采用實時熒光定量PCR檢測hep G2細胞中mir-132-3p的表達量;同時采用實時熒光定量PCR和western blot檢測hep G2細胞中SOX4 m RNA和蛋白質(zhì)的表達水平;運用MTT檢測24h、48h、72h hep G2細胞中各時期細胞增殖率情況;流式雙標(biāo)檢測細胞凋亡情況;劃痕實驗檢測細胞遷移情況;Transwell來檢測肝癌細胞的侵襲。結(jié)果:(1)實時熒光定量PCR結(jié)果顯示:hsa-mir-132 mimics轉(zhuǎn)染組hep G2細胞mir-132-3p的表達水平為(3.001±0.218),明顯高于正常對照組(0.930±0.102)和mimics轉(zhuǎn)染組(0.910±0.088),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。hsa-mir-132mimics轉(zhuǎn)染組hep G2細胞中SOX4 m RNA的表達量(0.388±0.114),明顯低于正常對照組(0.894±0.156)和mimics轉(zhuǎn)染組(0.918±0.157),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。(2)Western blot檢測hep G2細胞中SOX4蛋白質(zhì)的表達情況顯示:hsamir-132 mimics轉(zhuǎn)染組hep G2中SOX4/GAPDH的值為(0.180±0.045),明顯低于正常對照組(0.647±0.032)和mimics轉(zhuǎn)染組(0.663±0.032),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。(3)MTT實驗結(jié)果顯示:以正常對照組24h、48h、72h細胞增殖率100%為參照,hsa-mir-132 mimics轉(zhuǎn)染組hep G2細胞轉(zhuǎn)染后24h、48h、72h細胞增殖率分別為91.77%、84.55%、76.68%,明顯低于mimics轉(zhuǎn)染組轉(zhuǎn)染后24h、48h、72h細胞增殖率99.89%、99.94%、100.56%和正常對照組100%,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。(4)流式檢測結(jié)果顯示:(1)細胞凋亡結(jié)果顯示:hsa-mir-132 mimics轉(zhuǎn)染組細胞凋亡率為(18.79±0.44)%,明顯高于正常對照組(6.83±0.21)%和mimics轉(zhuǎn)染組(6.01±0.25)%,差異具有顯著性,P0.05。(5)劃痕與Transwell的實驗結(jié)果:(1)24h后hsa-mir-132 mimics轉(zhuǎn)染組細胞遷移數(shù)為(41±19)個,明顯低于正常對照組(232±38)個和mimics轉(zhuǎn)染在(225±28)個,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。(2)hsa-mir-132 mimics轉(zhuǎn)染組中hep G2細胞穿膜數(shù)量為(29±2)個,低于正常對照組(52±2)個和mimics轉(zhuǎn)染組(51±1)個,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。結(jié)論:過表達Mir-132-3p很可能通過下調(diào)SOX4抑制肝癌細胞的細胞增殖、遷移侵襲。
【關(guān)鍵詞】：hepG2 mir-132-3p SOX4 細胞增殖 侵襲
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮寫詞表9-10
• 第1章 前言10-12
• 第2章 材料和方法12-24
• 2.1 材料12-14
• 2.1.1 主要試劑和耗材12-13
• 2.1.2 主要器材13-14
• 2.2 研究方法14-23
• 2.2.1 細胞復(fù)蘇14-15
• 2.2.2 細胞傳代15
• 2.2.3 細胞轉(zhuǎn)染15-16
• 2.2.4 實時熒光定量PCR檢測hepG2中mir1323p和SOX4 mRNA的表達水平16-18
• 2.2.5 Western blot檢測hepG2中SOX4蛋白質(zhì)表達水平18-21
• 2.2.6 MTT實驗檢測hepG2增殖情況21-22
• 2.2.7 流式檢測hepG2中細胞凋亡22
• 2.2.8 劃痕實驗檢測hepG2細胞遷移22-23
• 2.2.9 Transwell檢測hepG2細胞侵襲23
• 2.3 統(tǒng)計學(xué)方法23-24
• 第3章 結(jié)果24-32
• 3.1 各組hepG2中mir1323p和SOX4 mRNA表達水平24-25
• 3.1.1 mir1323p表達水平24
• 3.1.2 SOX4 mRNA的表達水平24-25
• 3.2 各組hepG2中SOX4蛋白質(zhì)表達水平25-26
• 3.3 各組hepG2中細胞增殖率變化26-27
• 3.4 各組hepG2中細胞凋亡率27-29
• 3.5 各組hepG2中細胞遷移情況29-30
• 3.6 各組hepG2中細胞侵襲情況30-32
• 第4章 討論32-35
• 第5章 結(jié)論與展望35-36
• 5.1 結(jié)論35
• 5.2 展望35-36
• 致謝36-37
• 參考文獻37-40
• 綜述 Mir-132 在腫瘤中的研究進展40-49
• 參考文獻46-49

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