發(fā)布時(shí)間：2017-10-22 23:14

  本文關(guān)鍵詞：基因突變技術(shù)在抗體親和力體外成熟中的應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 抗體 親和力成熟 易錯(cuò)PCR DNA改組 突變株 定點(diǎn)突變 鏈替換

【摘要】：從天然抗體庫中篩選得到的抗體通常親和力較低,在微摩爾水平;同時(shí),經(jīng)過多次免疫獲得的天然抗體也存在100 pmol/L的親和力極限。然而,以抗體親和力體內(nèi)成熟為理論基礎(chǔ)的親和力體外成熟技術(shù),可以模擬體細(xì)胞高頻突變和克隆選擇過程。該技術(shù)可以解決庫來源抗體親和力不高、實(shí)際應(yīng)用難的問題,也可以幫助天然抗體突破其親和力極限�？贵w基因體外突變技術(shù)可以模擬自體高頻突變過程,是抗體親和力體外成熟的重要手段,常見的抗體基因體外突變技術(shù)可以分為易錯(cuò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)、DNA改組、突變株、定點(diǎn)突變和鏈替換等方法。易錯(cuò)PCR可以在抗體基因全長(zhǎng)或部分區(qū)域隨機(jī)引入突變,但隨著突變率的增加,陽性克隆數(shù)量呈指數(shù)性遞減。DNA改組包括抗體片段隨機(jī)化切割和重組步驟,可以加快抗體的體外進(jìn)化速度。突變株法易于構(gòu)建超大容量的抗體庫,但有害突變和突變率難以控制。定點(diǎn)突變的區(qū)域通常選擇與抗原直接接觸的互補(bǔ)決定區(qū)(complementary determination region,CDR)或自體突變熱點(diǎn)進(jìn)行操作。鏈替換通常保留母體抗體的一條重鏈或輕鏈,而對(duì)另一條鏈進(jìn)行隨機(jī)化組合。這些基因突變方法在提高抗體親和力中獲得了不同程度的應(yīng)用,但也存在效率不高,且方法選擇較為盲目等問題�？墒�,采用抗體X射線晶體衍射和計(jì)算機(jī)模擬等方法,卻可以幫助預(yù)測(cè)抗體結(jié)合部位,為突變位點(diǎn)的理性設(shè)計(jì)和方法選擇提供有效信息,因而成為親和力體外成熟技術(shù)未來發(fā)展的趨勢(shì)之一。
【作者單位】： 江蘇省食品質(zhì)量安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和農(nóng)業(yè)部食用農(nóng)產(chǎn)品安全監(jiān)控重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 抗體 親和力成熟 易錯(cuò)PCR DNA改組 突變株 定點(diǎn)突變 鏈替換
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31201535) 江蘇省社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目(BE2012750) 江蘇省農(nóng)業(yè)自主創(chuàng)新基金(CX(12)5042)
【分類號(hào)】：Q78;Q813.2
【正文快照】： Affinity maturation in vitro could mimic the mutation and selection process of affinity maturation in vivo,it could help toimprove the affinity of the antibodies derived from antibody libraries and make the natural antibodies to break through affinitycei

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 汪保安,王琰;基因工程抗體的體外親和力成熟[J];海軍總醫(yī)院學(xué)報(bào);2003年04期

2 胡曉林;張春明;;基因工程抗體親和力成熟的策略[J];免疫學(xué)雜志;2006年06期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 劉文俊;趙祖國(guó);呂世靜;晏雙雙;;噬菌體展示技術(shù)在抗體親和力成熟中的應(yīng)用進(jìn)展[J];免疫學(xué)雜志;2012年07期

2 徐重新;張霄;劉媛;王耘;張存政;劉賢進(jìn);;抗蘇云金芽孢桿菌Cry1B毒蛋白質(zhì)單鏈抗體的篩選與鑒定[J];江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2012年04期

3 李平;鄧省亮;于洪俠;楊曙明;;半抗原特異性抗體的篩選及親和力成熟[J];中國(guó)生物工程雜志;2010年02期

4 王碩;劉昕煜;吳懿娜;杜欣軍;朱超;張潔;;西維因抗體庫的構(gòu)建及特異性克隆的篩選[J];食品研究與開發(fā);2012年07期

5 葛良鵬;丁寧;蘭國(guó)成;鄒賢剛;劉作華;;治療性抗體的研究現(xiàn)狀與未來[J];中國(guó)生物工程雜志;2013年09期

6 陳東生;呂永寧;華小黎;譚璐;;鼠源性單克隆抗體改造的研究進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志;2009年16期

7 吳曉軍;張娟;陳衛(wèi);欒立標(biāo);王e，

本文編號(hào)：1080522