本文關(guān)鍵詞：低鈣敏感擬南芥自然變異種的篩選及相關(guān)基因的粗定位

  更多相關(guān)文章： 擬南芥 自然變異種 低鈣 表型分析 圖位克隆技術(shù)

【摘要】：為了能夠更好地理解植物在低鈣逆境中生長(zhǎng)發(fā)育的分子機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)主要以擬南芥自然變異種為材料,通過(guò)對(duì)96種自然變異種進(jìn)行篩選,篩選出一株低鈣敏感自然變異種Wt-5,對(duì)其進(jìn)行表型分析,發(fā)現(xiàn)Wt-5與擬南芥野生型Col-0相比,在低鈣培養(yǎng)基(含有0μM CaCl2、20μM CaCl2)中具有根短、葉小而且黃的表型,而在CK培養(yǎng)基(含有1mM CaCl2)中表型無(wú)明顯差異。通過(guò)原子吸收光譜的方法測(cè)定自然變異種Wt-5體內(nèi)的總鈣含量,發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)在CK培養(yǎng)液中的Wt-5和野生型Col-0相比,體內(nèi)總鈣含量低于Col-0；當(dāng)給予低鈣處理后,發(fā)現(xiàn)在葉片(大葉或小葉)中,Wt-5體內(nèi)的總鈣含量仍低于Col-0。我們將Wt-5與生態(tài)型Ler進(jìn)行雜交,得到F1和F2代植株,經(jīng)分析顯示W(wǎng)t-5為單基因隱性突變體。再利用圖位克隆技術(shù),將突變位點(diǎn)粗定位至擬南芥2號(hào)染色體18.14M -19.5Mbp范圍內(nèi)。
【關(guān)鍵詞】：擬南芥 自然變異種 低鈣 表型分析 圖位克隆技術(shù)
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：Q943.2
【目錄】：

• 摘要4-5
• abstract5-9
• 符號(hào)說(shuō)明9-10
• 一 引言10-18
• 1.1 鈣離子對(duì)植物的生理作用10
• 1.2 植物吸收鈣離子的分子機(jī)制10-15
• 1.2.1 鈣調(diào)素及類鈣調(diào)素蛋白(CaM)11-12
• 1.2.2 鈣調(diào)磷酸酶B類蛋白(CBL)12-13
• 1.2.3 鈣依賴性蛋白激酶(CDPK)13-15
• 1.3 鈣資源現(xiàn)狀15-16
• 1.3.1 酸雨對(duì)土壤中鈣的淋失15-16
• 1.3.2 酸雨對(duì)植物中鈣的影響16
• 1.4 圖位克隆的基本原理16-17
• 1.5 本研究的目的與意義17-18
• 二 材料與方法18-27
• 2.1 材料18-22
• 2.1.1 植物材料18
• 2.1.2 主要試劑18
• 2.1.3 主要溶液與培養(yǎng)基的配制18-19
• 2.1.4 引物列表19-22
• 2.2 方法22-27
• 2.2.1 擬南芥的播種與培養(yǎng)22-23
• 2.2.2 自然變異種Wt-5的篩選23
• 2.2.3 Wt-5水培表型觀察23
• 2.2.4 原子吸收測(cè)定總鈣含量23-24
• 2.2.5 CTAB法提取DNA24
• 2.2.6 Wt-5相關(guān)基因定位(圖位克隆)24-27
• 三 結(jié)果與分析27-35
• 3.1 自然變異種Wt-5的表型分析27-29
• 3.2 Wt-5總鈣含量測(cè)定結(jié)果29-30
• 3.3 Wt-5相關(guān)基因粗定位30-35
• 四 結(jié)論與討論35-37
• 4.1 結(jié)論35
• 4.2 討論35-37
• 參考文獻(xiàn)37-40
• 致謝40

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本文編號(hào)：1074436