本文關鍵詞：穩(wěn)定表達NLRC5基因肝癌細胞株的建立

  更多相關文章： NLRC 肝癌 穩(wěn)定細胞株 HepG

【摘要】：目的建立起能夠穩(wěn)定表達NLRC5基因的肝癌Hep G2細胞株。方法設計遺傳霉素(G418)的濃度梯度,通過對Hep G2細胞篩選最終確定篩選藥物濃度。將構建好的人源p EGFP-C2-NLRC5重組質(zhì)粒利用脂質(zhì)體介導法轉(zhuǎn)染至Hep G2肝癌細胞株中,用G418篩選出耐藥陽性克隆。通過免疫熒光技術觀察綠色熒光蛋白穩(wěn)定表達情況,Western blot法驗證NLRC5蛋白表達情況。結果 G418在14 d內(nèi)使Hep G2細胞全部死亡的最小濃度是300 ng/ml。用G418篩選瞬轉(zhuǎn)p EGFP-C2-NLRC5 14 d在熒光顯微鏡下可見耐藥克隆的形成。Western blot法檢測顯示,穩(wěn)定過表達組NLRC5的蛋白水平比空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組高(t=15.356,P0.05)。結論成功構建穩(wěn)定表達NLRC5基因的肝癌細胞株,為進一步研究NLRC5基因在肝癌的體內(nèi)實驗奠定了基礎。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學藥學院;合肥瑤海區(qū)長淮街道社區(qū)衛(wèi)生服務中心;
【關鍵詞】： NLRC 肝癌 穩(wěn)定細胞株 HepG
【基金】：國家自然科學基金(編號:81473268、81202978) 安徽省自然科學基金(編號:1308085MH145)
【分類號】：R735.7
【正文快照】： 2015-10-20接收肝細胞肝癌約占原發(fā)性肝癌的90%,已成為全世界最常見的惡性腫瘤之一,其死亡率在腫瘤相關死因中位列第三[1]。而肝癌的發(fā)生、發(fā)展主要與肝臟慢性炎癥等免疫反應所導致的肝細胞反復損傷與增生密切相關[2-3],深入了解和掌握免疫反應的分子機制將為今后治療與炎癥相

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周晶,沈志祥;過氧化物酶體增殖物激活受體與肝癌[J];腫瘤防治研究;2004年11期

2 段紀成;楊家和;劉凱;吳孟超;;單用絲裂霉素或表柔比星對肝癌細胞株的抑制作用[J];第二軍醫(yī)大學學報;2007年04期

3 楊盛力;彭靜;陳孝平;;中藥逆轉(zhuǎn)肝癌多藥耐藥的研究進展[J];肝膽外科雜志;2008年06期

4 魏莉;李愛民;羅榮城;;肝癌多藥耐藥及逆轉(zhuǎn)的研究進展[J];中國藥房;2009年07期

5 王智;;硒-甲基硒代半胱氨酸誘導肝癌SMMC-7721細胞株的凋亡及機制探討[J];江蘇醫(yī)藥;2012年11期

6 李培坤;耿小平;;肝癌耐藥的基因?qū)W研究進展[J];中華腫瘤防治雜志;2012年12期

7 龔民族;;大白鼠肝癌細胞株FSK 7901,FSK 7902的建立和特點[J];解剖學報;1981年03期

8 曹韻貞,湯釗猷;人體肝癌細胞株研究進展[J];腫瘤;1985年03期

9 ;視黃酸逆轉(zhuǎn)入肝癌細胞株的研究[J];上海醫(yī)科大學學報;1987年05期

10 偶曉明,王俊明,黃辰,關蓮璞,楊培金,林琳;肝癌細胞的融合方法探討[J];西安交通大學學報(醫(yī)學版);1992年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 魏緒勇;王建國;馮曉文;王雁;曹國強;陳海;徐驍;鄭樹森;;肝癌組織中氨基�；�-1表達及作用[A];2012中國器官移植大會論文匯編[C];2012年

2 魏緒勇;王建國;馮曉文;王雁;曹國強;陳海;徐驍;鄭樹森;;肝癌組織中氨基�；�-1表達及作用[A];2012年浙江省外科學學術年會論文集[C];2012年

3 唐瑞峰;馬艷鵬;吳建飛;孫建;張文華;黃亮;;白細胞介素2和白細胞介素6對肝癌細胞表達血管內(nèi)皮生長因子B的調(diào)節(jié)[A];第6屆全國疑難及重癥肝病大會論文集[C];2011年

4 唐瑞峰;孫超;馬艷鵬;吳建飛;孫建;張文華;;白細胞介素2和白細胞介素6對肝癌細胞表達血管內(nèi)皮生長因子D的調(diào)節(jié)[A];第6屆全國疑難及重癥肝病大會論文集[C];2011年

5 任軍;;肝癌的生物治療[A];第三屆中國腫瘤學術大會教育論文集[C];2004年

6 陳啟楨;林雅慧;;樟芝菌種于中藥草固態(tài)發(fā)酵萃取液對抗人類肝癌動物試驗功效研究[A];海峽兩岸第十屆菌物學暨第三屆食藥用菌學術研討會論文摘要集[C];2011年

7 楊建林;樊曉暉;;一株新發(fā)現(xiàn)的新城疫病毒高效殺傷肝癌細胞及其作用機制研究[A];2009醫(yī)學前沿論壇暨第十一屆全國腫瘤藥理與化療學術會議論文集[C];2009年

8 孫文潔;廖正凱;周福祥;張紅艷;黃成虎;熊杰;周云峰;;放射線對肝癌細胞中端粒酶啟動子活性的影響[A];2007第六屆全國放射腫瘤學學術年會論文集[C];2007年

9 王魯;湯釗猷;薛瓊;孫惠川;陳軍;高冬梅;趙燕;陳潔;;β干擾素抑制肝癌腫瘤生長和復發(fā)轉(zhuǎn)移的實驗研究[A];2000全國腫瘤學術大會論文集[C];2000年

10 葉依霞;周永健;李瑜元;張宗勝;;廣州市人群非酒精性脂肪性肝病的自然病程及危險因素[A];中華醫(yī)學會第十六次全國病毒性肝炎及肝病學術會議論文匯編[C];2013年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 李運紅邋胡顏;科學家從壁虎中分離出抗肝癌成分[N];新華每日電訊;2007年

2 張中橋;AFP可作為治療肝癌的新靶標[N];中國醫(yī)藥報;2006年

3 印高樂;臺灣研究發(fā)現(xiàn)黃體酯酮可降低肝癌復發(fā)率[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2004年

4 李運紅邋胡顏;我國科學家首次從壁虎中分離出抗腫瘤活性成分[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2007年

5 記者 陳建強邋通訊員 李運紅 胡顏;國內(nèi)首次從壁虎中分離出抗腫瘤活性成分[N];光明日報;2007年

6 李運紅邋胡顏;國內(nèi)首次從壁虎中分離出抗腫瘤活性成分[N];科技日報;2007年

7 劉道安邋運紅 胡顏;我國學者從壁虎中分離出抗腫瘤活性成分[N];中國醫(yī)藥報;2007年

8 劉道安邋通訊員 運紅 胡顏;壁虎中分離出抗腫瘤活性成分[N];健康報;2007年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張余琴;MiR-20a激活PTEN/PI3K/AKT通路誘導肝癌輻射抵抗[D];南方醫(yī)科大學;2015年

2 葉真龍;Argonaute-2蛋白在肝癌血管生成和擬態(tài)中的功能研究[D];第二軍醫(yī)大學;2015年

3 王健;缺氧誘導因子2α對肝癌細胞生物學行為的影響[D];華中科技大學;2006年

4 史以超;CCAAT/增強子結合蛋白α治療肝癌及其機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2012年

5 張巨波;干擾素Tα對肝癌復發(fā)再治療療效及相關機理的實驗研究[D];復旦大學;2007年

6 楊景波;利用光鑷和膜片鉗技術探索人肝癌細胞株膜電規(guī)律[D];中南大學;2013年

7 隋春陽;TLR4受體信號傳導通路參與人肝癌細胞株HepG-2分泌細胞因子機制的研究[D];中國醫(yī)科大學;2007年

8 舒波;缺氧對人肝癌細胞株BEL-7402多藥耐藥性的調(diào)控及HIF-1α RNAi對MDR1的干涉作用[D];中南大學;2006年

9 王瑋;VASN蛋白作為肝癌血清標志物及治療靶標的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2012年

10 陸藝;生存素基因在肝癌中的表達及基于其突變體的轉(zhuǎn)基因治療實驗研究[D];蘇州大學;2005年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李珊;光動力療法聯(lián)合氟尿嘧啶植入劑治療H22肝癌小鼠移植瘤的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

2 鄭巖;UC001kfo通過調(diào)控α-SMA對肝癌細胞株HepG2生物學行為的影響[D];鄭州大學;2015年

3 包萬員;HtrA1絲氨酸蛋白酶通過XIAP途徑逆轉(zhuǎn)肝癌細胞多藥耐藥的相關研究[D];蘇州大學;2015年

4 于瀚卿;肝癌HepG2細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激后COX2表達上調(diào)機制及其抗凋亡機制的研究[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

5 王小平;感染紅色熒光蛋白肝癌細胞的實驗研究及雙色熒光示蹤肝癌原位移植瘤模型的建立[D];蘇州大學;2015年

6 姜蓬壘;NK4增強肝癌細胞Li-7對5-FU的敏感性及其作用機制的研究[D];山西醫(yī)科大學;2015年

7 徐溢;Elongator對肝癌細胞遷移和侵襲的影響及其機制研究[D];蘇州大學;2015年

8 鄭紀虎;血小板源性生長因子D及其受體在肝癌中的表達及意義[D];蘇州大學;2009年

9 于之昊;氫離子調(diào)節(jié)通道在肝癌細胞的表達及其功能作用[D];遵義醫(yī)學院;2011年

10 夏士珊;人工抗原遞呈細胞體外激活肝癌患者外周血T淋巴細胞的研究[D];揚州大學;2011年

，

本文編號：1069009