本文關(guān)鍵詞：松墨天�；瘜W(xué)感受組織熒光定量PCR內(nèi)參基因的鑒定與篩選

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【摘要】：【目的】本研究擬選擇適合用于分析松墨天牛Monochamus alternatus化學(xué)感受組織中基因表達的內(nèi)參基因�！痉椒ā恳罁�(jù)轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果進行內(nèi)參基因鑒定,利用RT-q PCR技術(shù)分析內(nèi)參基因在松墨天牛不同發(fā)育階段和不同性別化學(xué)感受組織間的表達差異,并利用軟件ge Norm,Norm Finder和Best Keeper比較其表達的穩(wěn)定性�！窘Y(jié)果】松墨天牛轉(zhuǎn)錄組中鑒定出9個候選內(nèi)參基因(Actin,TUB,18S rRNA,RPS27A,RPS3,RPL10,AK,GAPDH和EF1A),其中后7個候選內(nèi)參基因在松墨天牛中被首次鑒定,松墨天牛候選內(nèi)參基因和其他昆蟲相應(yīng)基因的同源性很高。9個候選內(nèi)參基因引物均具有良好的擴增效率,18S rRNA的表達水平最高,EF1A的表達水平最低;18S rRNA和Actin在不同樣品間的表達水平差異最大,GAPDH和TUB表達水平在不同樣品間差異最小。ge Norm和Norm Finder軟件分析認為,GAPDH是最穩(wěn)定的內(nèi)參基因,TUB是較為穩(wěn)定的內(nèi)參基因,18S rRNA和Actin是最不穩(wěn)定的內(nèi)參基因;Best Keeper軟件分析認為,GAPDH和TUB是合適的內(nèi)參基因,18S rRNA和Actin是不適合的內(nèi)參基因。最適合校正松墨天�；瘜W(xué)感受組織中基因表達數(shù)據(jù)的內(nèi)參基因數(shù)量為2個,即GAPDH和TUB,并且這樣的內(nèi)參基因組合可以用于不同發(fā)育階段和不同性別的不同化學(xué)感受組織�！窘Y(jié)論】本研究結(jié)果為利用RT-q PCR技術(shù)準(zhǔn)確分析松墨天牛和其他天�；虬ɑ瘜W(xué)感受組織基因相對表達量的內(nèi)參基因選擇提供了重要參考。
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)健康與環(huán)境生態(tài)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 松墨天牛 內(nèi)參基因 化學(xué)感受 發(fā)育 熒光定量PCR
【基金】：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項基金(201203036)
【分類號】：S763.38
【正文快照】： 實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄PCR(real-time quantitativereverse transcription-PCR,RT-q PCR)是分子生物學(xué)領(lǐng)域研究基因表達的最有效方法之一(Yan et al.,2012)。在RT-q PCR實驗過程中,起始RNA質(zhì)量、c DNA合成效率等方面的差異可能影響結(jié)果,為了去除這些影響因素,需要引入內(nèi)參基因?qū)?

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 羅淋淋;吳華俊;林同;;松墨天牛ATP合成酶D亞基基因的鑒定與表達[J];林業(yè)科學(xué);2015年07期

2 錢凱;馮波;巫詡亮;勞沖;沈幼蓮;杜永均;;松墨天牛OBP基因MaltOBP2和MaltOBP6的克隆、序列分析及組織表達譜和原核表達研究[J];昆蟲學(xué)報;2015年05期

3 陳芳;陸永躍;;熱脅迫下棉花粉蚧內(nèi)參基因的篩選[J];昆蟲學(xué)報;2014年10期

4 許雯;羅淋淋;吳華俊;韋春梅;林同;;松墨天牛表皮蛋白基因的克隆及表達分析[J];昆蟲學(xué)報;2014年05期

5 蘇曉娟;樊保國;袁麗釵;崔秀娜;盧善發(fā);;實時熒光定量PCR分析中毛果楊內(nèi)參基因的篩選和驗證[J];植物學(xué)報;2013年05期

6 符偉;謝文;張卓;吳青君;王少麗;張友軍;;Bt毒素誘導(dǎo)下小菜蛾實時定量PCR內(nèi)參基因的篩選[J];昆蟲學(xué)報;2012年12期

7 陳孝仁;張博月;邢玉平;童蘊慧;徐敬友;;惡疫霉實時定量RT-PCR分析中內(nèi)參基因的選擇[J];中國農(nóng)學(xué)通報;2012年30期

8 袁偉;萬紅建;楊悅儉;;植物實時熒光定量PCR內(nèi)參基因的特點及選擇[J];植物學(xué)報;2012年04期

9 林同;張宇宏;常潤磊;張琪;溫秀軍;;松褐天牛泛素基因的克隆及表達[J];林業(yè)科學(xué);2009年09期

10 郝德君;馬鳳林;王焱;張永慧;戴華國;;松墨天牛對不同生理狀態(tài)黑松揮發(fā)物的觸角電生理和行為反應(yīng)[J];應(yīng)用生態(tài)學(xué)報;2006年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周曉馥;王晶;史宏偉;徐洪偉;;18S rRNA作為植物實時熒光定量PCR內(nèi)參基因的探究[J];吉林師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2016年02期

2 馬驪;孫萬倉;劉自剛;方彥;武軍艷;李學(xué)才;李欣;張淑娟;袁金海;陳奇;王凱音;方圓;;低溫脅迫下白菜型與甘藍型冬油菜抗寒基因表達差異[J];中國油料作物學(xué)報;2016年02期

3 胡紅元;任春麗;尚小麗;陳明明;王宇;王濤;吳建偉;;家蠅GAPDH基因的克隆、表達及作為內(nèi)參的可靠性分析[J];中國病原生物學(xué)雜志;2016年03期

4 馮波;郭前爽;毛必鵬;杜永均;;松墨天�；瘜W(xué)感受組織熒光定量PCR內(nèi)參基因的鑒定與篩選[J];昆蟲學(xué)報;2016年04期

5 程小娟;蔡立君;鄭麗雙;覃江梅;黃宇萍;尤民生;;小菜蛾氣味結(jié)合蛋白OBP2基因的克隆、表達譜及其結(jié)合特性分析[J];昆蟲學(xué)報;2016年04期

6 潘暢;張宇宏;龐虹;;孟氏隱唇瓢蟲qRT-PCR分析中內(nèi)參基因的篩選[J];環(huán)境昆蟲學(xué)報;2016年02期

7 史彩華;張友軍;;內(nèi)參基因在昆蟲實時熒光定量PCR中的研究進展[J];應(yīng)用昆蟲學(xué)報;2016年02期

8 周世豪;李磊;符悅冠;;高溫脅迫下瓜實蠅的內(nèi)參基因篩選[J];熱帶作物學(xué)報;2016年01期

9 朱海生;陳敏氡;溫慶放;藍新隆;李永平;王彬;張前榮;吳衛(wèi)東;;絲瓜18S rRNA基因克隆及其作為內(nèi)參基因的應(yīng)用[J];核農(nóng)學(xué)報;2016年01期

10 鄧祖麗穎;;文心蘭肌動蛋白基因(Actin)片段的克隆及表達分析[J];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2016年01期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫猛;陸明星;湯小天;杜予州;;大螟HSC70基因克隆及表達模式分析[J];昆蟲學(xué)報;2014年07期

2 林江波;王偉英;鄒暉;李海明;吳水金;戴藝民;;中國水仙葉綠體ATP合成酶基因NtATPF的克隆與序列分析[J];福建農(nóng)業(yè)學(xué)報;2014年06期

3 宋月芹;解幸承;董鈞鋒;仵均祥;;梨小食心蟲氣味結(jié)合蛋白GmolOBP3的cDNA克隆、表達譜及結(jié)合特性分析[J];昆蟲學(xué)報;2014年03期

4 韋春梅;羅淋淋;吳華俊;林同;;松墨天牛幼蟲cDNA文庫的構(gòu)建及EST分析[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2014年01期

5 趙婷;牛超;阮丹丹;南佳;叢維濤;金利泰;;ATP合成酶的翻譯后修飾[J];藥物生物技術(shù);2014年01期

6 岳秀利;高新菊;王進軍;呂娟娟;沈慧敏;;二斑葉螨內(nèi)參基因的篩選及解毒酶基因的表達水平[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年21期

7 楊順義;岳秀利;王進軍;沈慧敏;;二斑葉螨不同抗性品系最佳內(nèi)參基因的篩選及CYP392E亞家族基因的表達分析[J];昆蟲學(xué)報;2013年10期

8 丁吉同;阿地力·沙塔爾;胡成志;;溫度和相對濕度對扶桑綿粉蚧存活率的影響研究[J];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2013年05期

9 樊建庭;孟俊國;Baode Wang;趙莉藺;孫江華;;聚集性信息素和植物源信息素對松墨天牛的聯(lián)合誘捕作用[J];應(yīng)用昆蟲學(xué)報;2013年05期

10 魏丹;葉占峰;高建清;董雙林;;二化螟Minus-C氣味結(jié)合蛋白的分子克隆及功能鑒定[J];昆蟲學(xué)報;2013年07期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王志明;皮忠慶;候彬;;吉林省發(fā)現(xiàn)松墨天牛[J];中國森林病蟲;2006年03期

2 蔡建水;;松墨天牛的生物學(xué)特性及防治措施[J];現(xiàn)代園藝;2014年14期

3 梁細弟,蔣平,周連山,吳滄松,唐偉強,唐陸法;燈光誘殺松墨天牛的效果及評價[J];森林病蟲通訊;2000年04期

4 羅大民,彭文峰;福建松墨天牛調(diào)查及其危害病樹的早期診斷方法[J];廈門大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2000年02期

5 周成枚,陸高,肖靈亞;三種誘源監(jiān)測松墨天牛成蟲的比較[J];中國森林病蟲;2002年03期

6 方明剛;佳多頻振式殺蟲燈在松墨天牛測報與防治中的應(yīng)用[J];中國森林病蟲;2002年S1期

7 張永安,張龍,王玉珠,秦啟聯(lián),蔣平;防治松墨天牛的新病原——松墨天牛微粒子蟲[J];林業(yè)科學(xué)研究;2002年05期

8 胡長效,蘇新林,張艷秋;我國松墨天牛研究進展[J];河北林果研究;2003年03期

9 吳明,丁中文;纖維素酶抑制劑對松墨天牛消化生理的影響[J];浙江林業(yè)科技;2003年01期

10 王功桂,周靈會,王長旭,馬德君,盧斌;管氏腫腿蜂防治松墨天牛技術(shù)[J];中國森林病蟲;2004年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 嵇保中;;松墨天�；瘜W(xué)防治述評[A];江蘇省植病、昆蟲學(xué)會通訊2——江蘇省松材線蟲病研討會論文集[C];2003年

2 錢明惠;黃詠槐;范軍祥;沈木勝;;松墨天牛的日交配節(jié)律[A];第十五屆中國科協(xié)年會第19分會場：中國西部生態(tài)林業(yè)和民生林業(yè)與科技創(chuàng)新學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2013年

3 劉洪劍;董廣平;束慶龍;方建民;;球孢白僵菌對松墨天牛成蟲生活習(xí)性的影響[A];第二屆中國林業(yè)學(xué)術(shù)大會——S6 森林昆蟲與自然調(diào)控論文集[C];2009年

4 李恂;戴立霞;何慎;;郴州市松墨天牛生物學(xué)特性研究[A];第二屆中國林業(yè)學(xué)術(shù)大會——S6 森林昆蟲與自然調(diào)控論文集[C];2009年

5 劉洪劍;董廣平;束慶龍;方建民;;球孢白僵菌對松墨天牛成蟲生活習(xí)性的影響[A];第二屆中國林業(yè)學(xué)術(shù)大會——S5 森林病害及其防治論文集[C];2009年

6 郝德君;馬鳳林;王焱;戴華國;;松墨天牛對不同生理狀態(tài)黑松揮發(fā)物的觸角電生理反應(yīng)[A];昆蟲學(xué)研究進展[C];2005年

7 楊希;黃金水;;利用松墨天牛早期監(jiān)測松材線蟲病的研究[A];第二屆中國林業(yè)學(xué)術(shù)大會——S5 森林病害及其防治論文集[C];2009年

8 徐福元;葛明宏;徐克勤;;松墨天牛的生物防治技術(shù)研究[A];江蘇省植病、昆蟲學(xué)會通訊2——江蘇省松材線蟲病研討會論文集[C];2003年

9 何學(xué)友;黃金水;楊希;;球孢白僵菌、金龜子綠僵菌對松墨天牛致病力的測定[A];首屆中國林業(yè)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2005年

10 陳順立;張華峰;羅沛韜;張思祿;;松墨天牛為害對馬尾松針葉氮、磷、鉀含量的影響[A];當(dāng)代昆蟲學(xué)研究——中國昆蟲學(xué)會成立60周年紀(jì)念大會暨學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2004年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 記者 劉建波;為松墨天牛高效誘劑研發(fā)提供技術(shù)支撐[N];中國綠色時報;2013年

2 本報記者 任江華;生物防治病蟲害的尖兵[N];人民日報;2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 何學(xué)友;金龜子綠僵菌松墨天牛優(yōu)良菌株篩選及其林間宿存研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 魏亞楠;Ascarosides介導(dǎo)的松材線蟲與松墨天牛種間互作調(diào)控研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2015年

2 姚松;林分因素與松墨天牛數(shù)量關(guān)系及其補充營養(yǎng)階段狀況的研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

3 朱彥鵬;松墨天牛種群空間格局特征研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2009年

4 張慧波;傘真滑刃屬幾種線蟲在灰葡萄孢和盤多毛孢上移行和繁殖及松墨天牛成蟲攜帶線蟲能力研究[D];廈門大學(xué);2007年

5 趙程R，

本文編號：1062763