本文關(guān)鍵詞：GhWRKY44基因在煙草中遺傳轉(zhuǎn)化及功能分析

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【摘要】：為了進(jìn)一步驗(yàn)證GhWRKY44(登錄號(hào):KJ801807)基因在煙草異位表達(dá)后的功能,構(gòu)建了Ca MV35S啟動(dòng)子調(diào)控、Nos為終止子的棉花抗枯萎病相關(guān)基因(GhWRKY44)的過表達(dá)載體;電擊法將其導(dǎo)入農(nóng)桿菌GV3101,菌液PCR篩選鑒定陽(yáng)性菌株,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化煙草;T0轉(zhuǎn)化植株經(jīng)卡那霉素篩選、PCR檢測(cè)后,隨機(jī)從轉(zhuǎn)基因T0中選取5株進(jìn)行RT-PCR檢測(cè),均為陽(yáng)性株,說明GhWRKY44基因不僅整合到煙草基因組中而且還能正常轉(zhuǎn)錄。對(duì)過表達(dá)GhWRKY44基因的轉(zhuǎn)基因煙草T1株系進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)分析。結(jié)果表明,在正常生長(zhǎng)情況下,PR5和NPR1的表達(dá)量在轉(zhuǎn)GhWRKY44株系中明顯增加,枯萎病菌侵染后,在轉(zhuǎn)GhWRKY44株系中,PR1a、PR2和NPR1的表達(dá)量迅速增加,明顯高于野生型株系,而PR5的表達(dá)量則低于野生型株系,說明該目的基因能在煙草中異位表達(dá)并能激活病程相關(guān)蛋白基因的表達(dá),但其功能仍需進(jìn)一步研究。
【作者單位】： 石河子大學(xué)農(nóng)學(xué)院;新疆農(nóng)墾科學(xué)院生物技術(shù)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 煙草 GhWRKY 遺傳轉(zhuǎn)化 病程相關(guān)蛋白基因
【基金】：國(guó)家自然基金項(xiàng)目(31260358) 農(nóng)業(yè)部轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(xiàng)(2011ZX08005-005)
【分類號(hào)】：S572
【正文快照】： 轉(zhuǎn)錄因子(Transcription factor,TF)是一類能與真核基因啟動(dòng)子區(qū)域中的順式作用元件發(fā)生特異性結(jié)合,從而保證目的基因以特定的強(qiáng)度在特定的時(shí)間與空間表達(dá)的蛋白質(zhì)分子,植物種屬中的轉(zhuǎn)錄因子基因通常以家族的形式存在[1]。在植物的抗病性中,與防衛(wèi)反應(yīng)相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子有多種,如

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王翠亭,衛(wèi)志明;重要禾谷類糧食作物的遺傳轉(zhuǎn)化[J];植物生理學(xué)通訊;2002年02期

2 畢瑞明;陳立國(guó);后猛;王洪剛;;小麥的遺傳轉(zhuǎn)化[J];植物生理學(xué)通訊;2006年03期

3 李思經(jīng);;禾谷類作物遺傳轉(zhuǎn)化的篩選方法[J];生物技術(shù)通報(bào);1990年05期

4 朱遐;;滲透處理對(duì)玉米遺傳轉(zhuǎn)化的促進(jìn)作用[J];生物技術(shù)通報(bào);1993年09期

5 孫盈盈;遺傳轉(zhuǎn)化花粉長(zhǎng)成單倍體植株[J];生物技術(shù)通報(bào);1997年02期

6 任春梅,董延瑜;西瓜遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展[J];中國(guó)西瓜甜瓜;2000年02期

7 于晶;任朝陽(yáng);閔麗;蒼晶;;花粉管通道法在單子葉作物遺傳轉(zhuǎn)化上的應(yīng)用[J];東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年01期

8 李婉婷;于麗杰;劉佳娜;;DNA原位雜交技術(shù)在花粉管通道法遺傳轉(zhuǎn)化途徑研究中的應(yīng)用[J];北京農(nóng)業(yè);2007年36期

9 佟兆國(guó);蔡斌華;章鎮(zhèn);王富榮;張開春;閆國(guó)華;周宇;;果樹中基因槍法遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展[J];果樹學(xué)報(bào);2008年03期

10 李進(jìn)波;查中萍;萬丙良;戚華雄;;水稻TWH基因RNAi載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化[J];湖北農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年24期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孟輝;張?jiān)?張舉仁;;以小麥莖尖為受體的遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)基因耐鹽小麥的獲得[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

2 王小娟;李美菊;陳向東;沈萍;;跨屬細(xì)菌間細(xì)胞接觸自然遺傳轉(zhuǎn)化[A];湖北省遺傳學(xué)會(huì)、江西省遺傳學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2006年

3 黃敏仁;許農(nóng);;林木遺傳轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展[A];中國(guó)林木遺傳育種進(jìn)展[C];1991年

4 趙天永;王國(guó)英;;果樹的遺傳轉(zhuǎn)化研究-文獻(xiàn)綜述[A];中國(guó)科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì)第二屆青年學(xué)術(shù)年會(huì)園藝學(xué)論文集[C];1995年

5 劉清;吳順;沈革志;童建華;蕭浪濤;;遺傳轉(zhuǎn)化過程中水稻愈傷組織的內(nèi)源植物激素變化動(dòng)態(tài)研究[A];2007年全國(guó)植物生長(zhǎng)物質(zhì)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2007年

6 王萍;鄒艷;徐軍田;李信書;周向紅;易樂飛;;農(nóng)桿菌介導(dǎo)條斑紫菜遺傳轉(zhuǎn)化影響因子的研究[A];慶祝中國(guó)藻類學(xué)會(huì)成立30周年暨第十五次學(xué)術(shù)討論會(huì)摘要集[C];2009年

7 王姝杰;張成武;閆淑珍;李世訪;;苜蓿組織培養(yǎng)及遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)農(nóng)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)分會(huì)第六次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2004年

8 馬欣榮;楊曉娟;陳靜;鄧光兵;潘志芬;余懋群;;根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的多年生黑麥草的遺傳轉(zhuǎn)化[A];新世紀(jì) 新機(jī)遇 新挑戰(zhàn)——知識(shí)創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（上冊(cè)）[C];2001年

9 王小娟;陳向東;;屬間細(xì)菌質(zhì)粒自然遺傳轉(zhuǎn)化[A];第二屆中國(guó)青年學(xué)者微生物遺傳學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

10 石鳳敏;云錦鳳;趙彥;;農(nóng)桿菌介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化在禾本科植物中的應(yīng)用[A];中國(guó)草學(xué)會(huì)青年工作委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集(上冊(cè))[C];2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 羅在柒;農(nóng)桿菌介導(dǎo)虎杖芪合酶基因遺傳轉(zhuǎn)化棗樹增強(qiáng)抗性的研究[D];北京林業(yè)大學(xué);2015年

2 張研;RpoS在大腸桿菌自然遺傳轉(zhuǎn)化中的功能研究[D];武漢大學(xué);2013年

3 徐全樂;同源異型盒基因PttKN1在幾種花卉植物中的遺傳轉(zhuǎn)化及其功能研究[D];蘭州大學(xué);2008年

4 楊德翠;Cylindrocladium Canadense侵染對(duì)牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.）光合特性的影響以及牡丹病程相關(guān)蛋白1基因的克隆和遺傳轉(zhuǎn)化[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

5 田娜;農(nóng)桿菌介導(dǎo)的獼猴桃遺傳轉(zhuǎn)化及AtNHX1轉(zhuǎn)化植株抗鹽性分析；擬南芥At4G12490基因?qū)δ婢车目剐怨δ苎芯縖D];西北大學(xué);2010年

6 孟志剛;Bt殺蟲基因的結(jié)構(gòu)改造與功能研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李雪;北陵鳶尾(Iris typhifolia Kitag.)DREB轉(zhuǎn)錄因子的克隆及其對(duì)煙草的遺傳轉(zhuǎn)化[D];東北林業(yè)大學(xué);2015年

2 謝亮亮;PtFLC轉(zhuǎn)錄本超表達(dá)載體構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 劉瑞環(huán);農(nóng)桿菌介導(dǎo)的玉米莖尖遺傳轉(zhuǎn)化的研究[D];山東大學(xué);2015年

4 陳芳;小麥轉(zhuǎn)錄因子基因TaNF-YB2;1耐逆功能及TaZFP1~TaZFP4遺傳轉(zhuǎn)化[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

5 張弘;中國(guó)櫻桃PpcERF基因克隆與功能研究[D];浙江師范大學(xué);2015年

6 孟慶蕊;白術(shù)再生體系建立與農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 劉華玲;地錦（Parthenocissus tricuspidata）的遺傳轉(zhuǎn)化及抑菌活性研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（成都生物研究所）;2007年

8 宋剛;油，

本文編號(hào)：1054645