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慢病毒載體用于羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞基因表達(dá)實(shí)驗(yàn)

發(fā)布時(shí)間:2017-10-17 22:00

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【摘要】:目的探討慢病毒載體用于羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)基因表達(dá)關(guān)鍵問題。方法攜帶綠色熒光蛋白基因(Zs Green)的慢病毒載體感染羊MSCs獲得慢病毒轉(zhuǎn)染MSCs(MSCz),采用流式細(xì)胞儀、MTT檢測(cè)、三系分化等方法對(duì)MSCz比例、細(xì)胞形態(tài)、增殖及分化潛能進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果 MSCz保持骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞特有的長(zhǎng)梭形細(xì)胞形態(tài),并高效表達(dá)綠色熒光蛋白。流式細(xì)胞儀分析顯示MSCz比例隨感染復(fù)數(shù)(multiplicity of infection,MOI)增加而升高,在MOI值為20時(shí)MSCz比例可達(dá)71.2%。細(xì)胞生長(zhǎng)曲線分析表明MSCz與MSCs增殖模式和能力相同。三系分化證實(shí)MSCz與MSCs在向骨、脂肪和軟骨細(xì)胞分化方面沒有差異。過氧化氫和低氧處理表明MSCz、MSCs對(duì)這些不利環(huán)境反應(yīng)相同。結(jié)論慢病毒載體是羊MSCs基因表達(dá)的良好載體。
【作者單位】: 解放軍總醫(yī)院普通外科研究所;武裝警察總醫(yī)院肛腸研究所;解放軍總醫(yī)院心血管外科;
【關(guān)鍵詞】羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 慢病毒載體 轉(zhuǎn)染
【分類號(hào)】:R329.2;Q78
【正文快照】: 間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的多向分化潛能、向損傷位點(diǎn)遷移和分泌多種細(xì)胞因子等特性使其成為再生醫(yī)學(xué)和基因治療中極具潛能的細(xì)胞[1-3]。運(yùn)用基因工程技術(shù)改變基因表達(dá)研究基因功能、發(fā)展基因治療策略,可為開發(fā)MSCs潛能提供強(qiáng)有力的手段[4-6]。表達(dá)載體攜帶

【相似文獻(xiàn)】

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9 張U,

本文編號(hào):1051262


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