本文關(guān)鍵詞：甘肅紅豆草BAN基因克隆與雙標(biāo)記選擇表達(dá)載體構(gòu)建

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【摘要】：為探討編碼花青素還原酶BAN基因的功能及其與縮合單寧合成的關(guān)系,根據(jù)BAN基因序列設(shè)計(jì)特異引物,采用RT-PCR技術(shù)獲得甘肅紅豆草BAN的相似基因;利用生物信息學(xué)相關(guān)軟件分析,預(yù)測(cè)其c DNA序列編碼的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能;采用Real-time PCR法檢測(cè)該基因在甘肅紅豆草各組織中的表達(dá);構(gòu)建含有BAN基因的雙標(biāo)記選擇載體。結(jié)果表明,克隆的BAN基因與報(bào)道的BAN基因序列相似性達(dá)到99.41%,其ORF長(zhǎng)為1 020 bp,可編碼339個(gè)氨基酸殘基,具有花青素還原酶保守結(jié)構(gòu)域和重要功能位點(diǎn);三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)顯示,預(yù)測(cè)模型與花青素還原酶單體結(jié)構(gòu)(C2RH8A)相似,屬于短鏈脫氫/還原酶超家族成員,表明其可能具有花青素還原酶的功能。BAN基因在各組織中均表達(dá),其表達(dá)量依次為莢果、葉、蕾、花、莖。以此為靶序列,構(gòu)建攜帶抗除草劑bar和綠色熒光蛋白GFP基因的雙標(biāo)記選擇植物表達(dá)載體,將為縮合單寧合成、代謝的進(jìn)一步研究及抗除草劑和抗臌脹病牧草新品種的培育奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院/草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展研究中心;河南科技大學(xué)農(nóng)學(xué)院;甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)院;西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 甘肅紅豆草 基因克隆 表達(dá)分析 載體構(gòu)建
【基金】：甘肅省科技廳科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(1104NKCA087) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31502012)
【分類號(hào)】：S541.4
【正文快照】： 縮合單寧(原花青素)是植物類黃酮生物合成途徑的終端產(chǎn)物,在自然界中廣泛存在,主要存在于植物的果實(shí)、種子、花和外皮中,也存在于蔬菜、水果和糧食中。縮合單寧也是一種重要的生物源強(qiáng)效抗氧化劑和自由基清除劑,其在生物體內(nèi)具有抗紫外線、抗病、抗蟲,清除自由基,調(diào)節(jié)種子休眠

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1049159