MiR-145調(diào)控c-Myc基因表達(dá)影響鼻咽癌細(xì)胞的增殖
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更多相關(guān)文章: 鼻咽癌 mi R-145 c-Myc 增殖 細(xì)胞周期
【摘要】:【目的】探究miR-145對(duì)鼻咽癌細(xì)胞增殖的影響以及其可能的機(jī)制。【方法】用實(shí)時(shí)定量PCR(RT-qPCR)法檢測(cè)在NP69,CNE-1,CNE-2及CNE-2Z細(xì)胞系中mi R-145和c-Myc的表達(dá)水平。分別將miR-Negative control、miR-145 mimics轉(zhuǎn)染CNE-1細(xì)胞,用qRT-PCR法檢測(cè)miR-145轉(zhuǎn)染效果,以CCK-8檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的增殖情況,通過(guò)碘化丙啶(PI)染色檢測(cè)細(xì)胞周期。利用RNAi(RNAinterference)技術(shù)將si-NC與si-c-Myc轉(zhuǎn)入CNE-1細(xì)胞中,然后檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力和細(xì)胞周期情況。最后通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn),共轉(zhuǎn)染miR-145與c-Myc 3’UTR報(bào)告載體,檢測(cè)miR-145與基因c-Myc的關(guān)系。【結(jié)果】與鼻咽正常上皮細(xì)胞相比,miR-145在鼻咽癌細(xì)胞系中明顯下調(diào)。miR-145可以明顯抑制CNE-1細(xì)胞的生長(zhǎng)(3d:1.03±0.02,P0.05;4d:1.79±0.02,P0.01),并使細(xì)胞周期G1期阻滯((74.43±1.55)%;(69.98±1.16)%,P0.01),miR-145可以直接作用于c-Myc的3’UTR區(qū)域,抑制c-Myc的表達(dá)。c-Myc下調(diào)可明顯抑制CNE-1細(xì)胞的生長(zhǎng)(3d:0.80±0.02,P0.01;4d:1.68±0.4,P0.01),使細(xì)胞G1期阻滯((69.77±0.87)%;(54.10±2.26)%,P0.01)。miR-145能直接靶向c-Myc,調(diào)控c-Myc的表達(dá)。mi R-145調(diào)控鼻咽癌細(xì)胞增殖的效應(yīng)是通過(guò)靶向調(diào)控c-Myc的表達(dá)發(fā)揮作用的。【結(jié)論】(1)miR-145在鼻咽癌中低表達(dá)。(2)miR-145可以使鼻咽癌細(xì)胞的增殖抑制并阻滯細(xì)胞周期于G1期。(3)干擾c-Myc后鼻咽癌細(xì)胞的增殖也受到抑制并阻滯細(xì)胞周期于G1期。(4)miR-145可以靶向作用于c-Myc的3’UTR區(qū),c-Myc是miR-145的直接靶基因。(5)miR-145通過(guò)靶向作用于c-Myc抑制鼻咽癌細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖,此條通路可為深入探索鼻咽癌的診斷和治療提供可能的靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】:鼻咽癌 mi R-145 c-Myc 增殖 細(xì)胞周期
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R739.63
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-9
- 前言9-12
- 參考文獻(xiàn)11-12
- 臨床資料與方法12-18
- 結(jié)果18-28
- 討論28-30
- 結(jié)論30-31
- 參考文獻(xiàn)31-33
- 綜述33-39
- 參考文獻(xiàn)37-39
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的文章39-40
- 英文縮略詞表40-41
- 致謝41-42
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