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鐵皮石斛WRKY5基因的克隆與表達(dá)分析

發(fā)布時間:2017-10-15 06:06

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【摘要】:目的克隆鐵皮石斛Do WRKY5基因,并對生物信息學(xué)和表達(dá)模式進(jìn)行分析。方法通過轉(zhuǎn)錄組測序和RT-PCR方法相結(jié)合首次從鐵皮石斛中克隆到一個WRKY基因,利用生物信息學(xué)工具對其進(jìn)行分析,并利用熒光定量PCR分析其在鐵皮石斛中的組織表達(dá)模式及在低溫脅迫、脫落酸(ABA)脅迫和蔗糖滲透脅迫下的表達(dá)模式。結(jié)果獲得長1 336 bp的Do WRKY5基因轉(zhuǎn)錄因子c DNA全長序列,開放閱讀框?yàn)?34 bp,編碼277個氨基酸殘基,含有一個WRKY基因保守結(jié)構(gòu)域和一個C2H2鋅指結(jié)構(gòu)域,屬于WRKY基因家族的第II類成員。q RT-PCR分析表明,Do WRKY5基因在鐵皮石斛根、莖、葉中均有表達(dá),但在葉中的表達(dá)量最高。在不同低溫和4℃不同時間誘導(dǎo)處理后,該基因表達(dá)量均顯著升高,并且該基因在ABA脅迫和蔗糖滲透脅迫下均可被誘導(dǎo)表達(dá)。結(jié)論 Do WRKY5基因在鐵皮石斛應(yīng)答低溫脅迫等多種非生物脅迫中可能起重要的調(diào)控作用,為進(jìn)一步研究鐵皮石斛的抗寒機(jī)制和抗寒性品種的選育提供基礎(chǔ)。
【作者單位】: 浙江農(nóng)林大學(xué)亞熱帶森林培育國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地浙江省鐵皮石斛產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新戰(zhàn)略聯(lián)盟;
【關(guān)鍵詞】鐵皮石斛 WRKY轉(zhuǎn)錄因子 實(shí)時熒光定量PCR 低溫脅迫 脫落酸脅迫
【基金】:浙江省重大科技專項(xiàng)(2012C12912-9) 浙江省林學(xué)重中之重一級學(xué)科研究生創(chuàng)新項(xiàng)目(201530)
【分類號】:S567.239
【正文快照】: 蔣園,朱玉球*,高燕會,斯金平植物在長期的進(jìn)化過程中形成了一系列用于調(diào)節(jié)自身生長發(fā)育、抵御生物和非生物脅迫逆境的機(jī)制。植物接受脅迫信號后,通過一系列的信號傳遞途徑,最終誘導(dǎo)相關(guān)基因的表達(dá)來抵御各種脅迫。在調(diào)節(jié)基因表達(dá)的過程中,轉(zhuǎn)錄因子起著重要的作用[1]。WRKY轉(zhuǎn)錄

本文編號:1035481

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