本文關(guān)鍵詞：大腸桿菌yfiF基因原核表達系統(tǒng)構(gòu)建、表達條件優(yōu)化及蛋白純化

  更多相關(guān)文章： yfiF基因 pETb質(zhì)粒 原核表達 蛋白純化

【摘要】：[目的]構(gòu)建大腸桿菌功能未知基因yfi F的原核表達系統(tǒng),對誘導表達條件進行優(yōu)化,并純化表達的可溶性Yfi F融合蛋白。[方法]使用p ET16b表達質(zhì)粒構(gòu)建p ET16b-yfi F原核表達載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21,IPTG誘導表達Yfi F融合蛋白,對IPTG加入時機、終濃度及誘導時間進行優(yōu)化,并使用鎳柱純化裂菌上清液中的可溶性Yfi F融合蛋白。[結(jié)果]構(gòu)建了p ET16b-yfi F重組質(zhì)粒,IPTG誘導表達Yfi F融合蛋白,最佳誘導條件為細菌生長至OD600值為1時加入IPTG,終濃度為0.1 mmol/L,誘導9 h。裂菌上清液中的可溶性Yfi F融合蛋白純化后濃度為209μg/ml。[結(jié)論]成功構(gòu)建了yfi F的原核表達系統(tǒng),優(yōu)化了誘導表達條件,可溶性Yfi F融合蛋白得到純化。
【作者單位】： 內(nèi)蒙古大學生命科學學院;內(nèi)蒙古民族大學生命科學學院;
【關(guān)鍵詞】： yfiF基因 pETb質(zhì)粒 原核表達 蛋白純化
【分類號】：Q78
【正文快照】： 大腸桿菌細胞的擬核有1個DNA分子,長度約為4.7 Mbp,在DNA分子上分布著大約4 400個基因,每個基因的平均長度約為1 000 bp。隨著研究的不斷深入,很多基因的功能和作用機制已經(jīng)明確,但是仍然有一些基因的功能和作用機制還不清楚。大腸桿菌yfi F基因是一個功能未知的基因,它所編碼

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本文編號：1030779