本文關(guān)鍵詞：極端嗜酸熱古菌Acidianus manzaensis胞外硫活化蛋白質(zhì)基因的篩選及鑒定

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【摘要】：以極端嗜酸熱古菌(Acidianus manzaensis)為研究對(duì)象,基于比較蛋白質(zhì)組學(xué)的研究方法篩選和鑒定了13個(gè)A.manzaensis胞外與硫活化相關(guān)的蛋白質(zhì)基因,并從轉(zhuǎn)錄水平對(duì)其進(jìn)行了驗(yàn)證。首先通過(guò)80℃緩慢搖動(dòng)水浴30 min分別對(duì)A.manzaensis在單質(zhì)硫(S0)和亞鐵(Fe2+)為能源底物進(jìn)行生長(zhǎng)時(shí)的胞外蛋白質(zhì)進(jìn)行提取,并用雙向電泳(2-DE)進(jìn)行分離,然后選取在S0底物下差異表達(dá)的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)進(jìn)行串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF/TOF)鑒定和生物信息學(xué)分析及功能預(yù)測(cè),最后用實(shí)時(shí)定量PCR(RT-q PCR)對(duì)篩選得到的胞外S0活化相關(guān)蛋白基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄水平的驗(yàn)證;最終獲得了13個(gè)極端嗜酸熱古菌A.manzaensis胞外活化S0相關(guān)的蛋白質(zhì)基因。篩選得到的蛋白質(zhì)中一半以上含有較多的半胱氨酸殘基(Cys),說(shuō)明胞外富含巰基(-SH)的蛋白參與了S0活化;其中谷氧還蛋白(glutaredoxin)和FAD鍵合氧化酶均含有-CXXC-結(jié)構(gòu)域,且兩種蛋白質(zhì)的基因表達(dá)量較高,說(shuō)明含有-CXXC-結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)在極端嗜酸熱古菌A.manzaensis活化S0的過(guò)程中起重要的作用。
【作者單位】： 中南大學(xué)資源加工與生物工程學(xué)院;中南大學(xué)教育部生物冶金重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： Acidianus manzaensis 比較蛋白質(zhì)組學(xué) 胞外蛋白質(zhì) 硫活化
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(51274257)
【分類號(hào)】：Q936
【正文快照】： 硫化礦生物浸出技術(shù)在復(fù)雜低品位原生硫化礦生物提取、金礦表面硫化礦的氧化預(yù)處理、以及硫化礦尾礦的治理和金屬回收等方面可以發(fā)揮重大作用[1]。常見(jiàn)的硫化礦生物浸出微生物可根據(jù)其最適生長(zhǎng)溫度劃分為常溫微生物(30-40℃)、中度嗜熱微生物(40-60℃)和極端嗜熱微生物(80℃以，

本文編號(hào)：1029376