本文關(guān)鍵詞：暗黑鰓金龜氣味結(jié)合蛋白HparOBP15a基因的克隆及功能分析

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【摘要】：【目的】暗黑鰓金龜Holotrichia parallela通過(guò)氣味結(jié)合蛋白(odorant binding protein,OBP)識(shí)別性信息素和植物揮發(fā)物準(zhǔn)確而迅速地定位配偶、寄主植物。本研究通過(guò)克隆暗黑鰓金龜氣味結(jié)合蛋白15a(Hpar OBP15a)基因,解析該基因的編碼蛋白特征、組織表達(dá)模式及與寄主植物氣味等化合物的結(jié)合特性方面的研究,為闡明暗黑鰓金龜基于嗅覺(jué)識(shí)別的寄主植物選擇機(jī)理奠定理論基礎(chǔ)�！痉椒ā扛鶕�(jù)暗黑鰓金龜成蟲(chóng)觸角轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的結(jié)果,利用RT-PCR克隆了Hpar OBP15a基因;Real-time PCR方法分析了該基因在成蟲(chóng)不同部位的表達(dá)量差異;熒光競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合測(cè)定了Hpar OBP15a蛋白和58種候選化合物的結(jié)合特征�！窘Y(jié)果】暗黑鰓金龜Hpar OBP15a基因全長(zhǎng)534 bp,編碼147個(gè)氨基酸,Gen Bank登錄號(hào)為AK1834747。Hpar OBP15a在觸角中特異表達(dá),且在雌蟲(chóng)觸角中表達(dá)量顯著高于雄蟲(chóng)。在被測(cè)的58種化合物中,Hpar OBP15a與46種氣味化合物具有較好的親和性,其中與十二烷、十二醇結(jié)合能力最強(qiáng),其解離常數(shù)分別為8.5和11.3μmol/L;同時(shí),對(duì)性信息素(L-異亮氨酸甲酯和R-芳樟醇)也有一定的結(jié)合能力(解離常數(shù)分別為21.0和18.5μmol/L)�！窘Y(jié)論】Hpar OBP15a具有廣泛的氣味結(jié)合譜,其中對(duì)榆樹(shù)揮發(fā)物十二烷的結(jié)合能力最強(qiáng),因此該蛋白可能在暗黑鰓金龜對(duì)榆樹(shù)的定位過(guò)程中具有重要作用。
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病蟲(chóng)害生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 暗黑鰓金龜 氣味結(jié)合蛋白 組織表達(dá) 蛋白純化 熒光競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31572007;31371997)
【分類號(hào)】：S433
【正文快照】： 植物病蟲(chóng)害生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京100193)嗅覺(jué)系統(tǒng)在昆蟲(chóng)生存和適應(yīng)環(huán)境中均具有重要作用,能從成千上萬(wàn)種不同氣味中識(shí)別出某些特異性氣味物質(zhì)(王桂榮等,2002)。昆蟲(chóng)對(duì)氣味的識(shí)別主要涉及氣味結(jié)合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)、氣味受體(odorant receptors,ORs)、

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3 蔣海霖;殷濟(jì)書;朱紹義;湯東兵;袁鵬舉;吳興德;;暗黑鰓金龜發(fā)生規(guī)律與卵孢白僵菌防治技術(shù)研究[A];“植物保護(hù)21世紀(jì)展望”——植物保護(hù)21世紀(jì)展望暨第三屆全國(guó)青年植物保護(hù)科技工作者學(xué)術(shù)研討會(huì)文集[C];1998年

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