本文關(guān)鍵詞：暗黑鰓金龜氣味結(jié)合蛋白HparOBP15a基因的克隆及功能分析

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【摘要】：【目的】暗黑鰓金龜Holotrichia parallela通過氣味結(jié)合蛋白(odorant binding protein,OBP)識別性信息素和植物揮發(fā)物準確而迅速地定位配偶、寄主植物。本研究通過克隆暗黑鰓金龜氣味結(jié)合蛋白15a(Hpar OBP15a)基因,解析該基因的編碼蛋白特征、組織表達模式及與寄主植物氣味等化合物的結(jié)合特性方面的研究,為闡明暗黑鰓金龜基于嗅覺識別的寄主植物選擇機理奠定理論基礎(chǔ)。【方法】根據(jù)暗黑鰓金龜成蟲觸角轉(zhuǎn)錄組測序的結(jié)果,利用RT-PCR克隆了Hpar OBP15a基因;Real-time PCR方法分析了該基因在成蟲不同部位的表達量差異;熒光競爭結(jié)合測定了Hpar OBP15a蛋白和58種候選化合物的結(jié)合特征。【結(jié)果】暗黑鰓金龜Hpar OBP15a基因全長534 bp,編碼147個氨基酸,Gen Bank登錄號為AK1834747。Hpar OBP15a在觸角中特異表達,且在雌蟲觸角中表達量顯著高于雄蟲。在被測的58種化合物中,Hpar OBP15a與46種氣味化合物具有較好的親和性,其中與十二烷、十二醇結(jié)合能力最強,其解離常數(shù)分別為8.5和11.3μmol/L;同時,對性信息素(L-異亮氨酸甲酯和R-芳樟醇)也有一定的結(jié)合能力(解離常數(shù)分別為21.0和18.5μmol/L)�！窘Y(jié)論】Hpar OBP15a具有廣泛的氣味結(jié)合譜,其中對榆樹揮發(fā)物十二烷的結(jié)合能力最強,因此該蛋白可能在暗黑鰓金龜對榆樹的定位過程中具有重要作用。
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院;中國農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所植物病蟲害生物學國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 暗黑鰓金龜 氣味結(jié)合蛋白 組織表達 蛋白純化 熒光競爭結(jié)合實驗
【基金】：國家自然科學基金項目(31572007;31371997)
【分類號】：S433
【正文快照】： 植物病蟲害生物學國家重點實驗室,北京100193)嗅覺系統(tǒng)在昆蟲生存和適應(yīng)環(huán)境中均具有重要作用,能從成千上萬種不同氣味中識別出某些特異性氣味物質(zhì)(王桂榮等,2002)。昆蟲對氣味的識別主要涉及氣味結(jié)合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)、氣味受體(odorant receptors,ORs)、

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本文編號：1028270