本文關(guān)鍵詞：杉木熒光標(biāo)記通用引物多重PCR微衛(wèi)星基因分型技術(shù)的建立與應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 杉木 微衛(wèi)星 基因分型 熒光標(biāo)記 多重PCR

【摘要】：熒光標(biāo)記通用引物基因分型技術(shù)以其經(jīng)濟(jì)、實(shí)用的特點(diǎn)在微衛(wèi)星標(biāo)記研究中得到了較多應(yīng)用。但傳統(tǒng)以M13為通用引物的方法存在非特異性擴(kuò)增條帶多、基因分型質(zhì)量差等問(wèn)題。為加快微衛(wèi)星基因分型新技術(shù)的推廣和應(yīng)用,提高林木分子遺傳學(xué)研究水平,本研究參照Blacket等的方法,并結(jié)合微衛(wèi)星多重PCR(multiplex PCR)技術(shù),成功建立了杉木(Cunninghamia lanceolata)熒光標(biāo)記通用引物多重PCR微衛(wèi)星基因分型技術(shù)體系。新方法的關(guān)鍵在于應(yīng)用了4個(gè)具有較高退火溫度的通用引物和QIAGEN姈Multiplex PCR試劑盒,它們能有效減少非特異性擴(kuò)增條帶的產(chǎn)生,多重PCR體系的優(yōu)化簡(jiǎn)單、快捷。通常只需調(diào)整通用引物的濃度和PCR產(chǎn)物稀釋倍數(shù),就能獲得清晰、穩(wěn)定的基因分型結(jié)果。研究表明,新方法不僅大幅度降低了實(shí)驗(yàn)成本,而且顯著提高了微衛(wèi)星基因分型效率。利用該技術(shù)實(shí)現(xiàn)了杉木EST-SSR標(biāo)記位點(diǎn)的規(guī)模化開(kāi)發(fā),并開(kāi)展了杉木種子園育種材料遺傳多樣性研究。本研究新技術(shù)的建立和應(yīng)用可為杉木分子遺傳學(xué)研究提供技術(shù)保障,也對(duì)其他物種的相關(guān)研究具有重要的參考價(jià)值。
【作者單位】： 中南林業(yè)科技大學(xué);廣東省韶關(guān)市林業(yè)局;
【關(guān)鍵詞】： 杉木 微衛(wèi)星 基因分型 熒光標(biāo)記 多重PCR
【基金】：國(guó)家林業(yè)局948國(guó)際引進(jìn)項(xiàng)目(2015-4-18) 湖南省自然科學(xué)基金(10JJ2018)共同資助
【分類(lèi)號(hào)】：S791.27
【正文快照】： Establishment of Microsatellite Marker Genotyping Technology by Multipl-ex PCR with Fluorescently Labelled Universal Primers and Application onChinese Fir(Cunninghamia lanceolata)Wu Xingtong1Wen Yafeng1*Han Wenjun1Zhou Hong2Xu Gangbiao11 Central South Un

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本文編號(hào)：1024712