本文關鍵詞：杉木熒光標記通用引物多重PCR微衛(wèi)星基因分型技術的建立與應用

  更多相關文章： 杉木 微衛(wèi)星 基因分型 熒光標記 多重PCR

【摘要】：熒光標記通用引物基因分型技術以其經(jīng)濟、實用的特點在微衛(wèi)星標記研究中得到了較多應用。但傳統(tǒng)以M13為通用引物的方法存在非特異性擴增條帶多、基因分型質(zhì)量差等問題。為加快微衛(wèi)星基因分型新技術的推廣和應用,提高林木分子遺傳學研究水平,本研究參照Blacket等的方法,并結(jié)合微衛(wèi)星多重PCR(multiplex PCR)技術,成功建立了杉木(Cunninghamia lanceolata)熒光標記通用引物多重PCR微衛(wèi)星基因分型技術體系。新方法的關鍵在于應用了4個具有較高退火溫度的通用引物和QIAGEN姈Multiplex PCR試劑盒,它們能有效減少非特異性擴增條帶的產(chǎn)生,多重PCR體系的優(yōu)化簡單、快捷。通常只需調(diào)整通用引物的濃度和PCR產(chǎn)物稀釋倍數(shù),就能獲得清晰、穩(wěn)定的基因分型結(jié)果。研究表明,新方法不僅大幅度降低了實驗成本,而且顯著提高了微衛(wèi)星基因分型效率。利用該技術實現(xiàn)了杉木EST-SSR標記位點的規(guī)模化開發(fā),并開展了杉木種子園育種材料遺傳多樣性研究。本研究新技術的建立和應用可為杉木分子遺傳學研究提供技術保障,也對其他物種的相關研究具有重要的參考價值。
【作者單位】： 中南林業(yè)科技大學;廣東省韶關市林業(yè)局;
【關鍵詞】： 杉木 微衛(wèi)星 基因分型 熒光標記 多重PCR
【基金】：國家林業(yè)局948國際引進項目(2015-4-18) 湖南省自然科學基金(10JJ2018)共同資助
【分類號】：S791.27
【正文快照】： Establishment of Microsatellite Marker Genotyping Technology by Multipl-ex PCR with Fluorescently Labelled Universal Primers and Application onChinese Fir(Cunninghamia lanceolata)Wu Xingtong1Wen Yafeng1*Han Wenjun1Zhou Hong2Xu Gangbiao11 Central South Un

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王艷梅;馬天曉;翟明普;;中國特有種虎榛SSR反應體系的初步研究[J];北方園藝;2009年06期

2 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 閻毛毛;戴曉港;李淑嫻;尹佟明;;松樹、楊樹及桉樹表達基因序列微衛(wèi)星比對分析[A];江蘇省遺傳學會第八屆會員代表大會暨學術研討會論文集[C];2010年

，

本文編號：1024712