表達H5亞型禽流感病毒不同形式HA基因重組鴨瘟病毒的構(gòu)建及HA表達形式的鑒定
本文關(guān)鍵詞:表達H5亞型禽流感病毒不同形式HA基因重組鴨瘟病毒的構(gòu)建及HA表達形式的鑒定
更多相關(guān)文章: 禽流感病毒 HA蛋白 重組鴨瘟病毒 信號肽 跨膜區(qū)
【摘要】:為研究禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的信號肽以及跨膜區(qū)對HA蛋白在重組病毒中表達的影響,本研究以鴨瘟病毒(DEV)為載體,在DEV基因組的US7和US8基因之間通過同源重組插入去除信號肽或跨膜區(qū)的H5N1亞型AIV HA基因編碼序列,分別構(gòu)建了缺失信號肽HA基因的DEV重組病毒(r DEV-PK)和缺失跨膜區(qū)HA基因的DEV重組病毒(r DEV-PSM),并傳至20代,經(jīng)PCR對插入的外源基因編碼序列擴增及序列測定,表明外源基因能夠在重組病毒基因組中穩(wěn)定存在;間接免疫熒光和western blot鑒定結(jié)果表明去除信號肽的HA蛋白能夠在重組病毒感染的雞胚成纖維細胞漿中正確表達,而去除跨膜區(qū)的HA蛋白能夠在感染細胞的培養(yǎng)液中檢測到。本研究為表達H5N1亞型AIV HA基因重組DEV載體弱毒疫苗在鴨體內(nèi)免疫機制的進一步研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】: 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國家重點實驗室/農(nóng)業(yè)部動物流感重點開放實驗室;
【關(guān)鍵詞】: 禽流感病毒 HA蛋白 重組鴨瘟病毒 信號肽 跨膜區(qū)
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31302064)
【分類號】:S852.65
【正文快照】: 禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)是正粘病毒科有囊膜多形態(tài)單股負鏈RNA病毒。多數(shù)家禽均可以感染發(fā)病,嚴重威脅養(yǎng)禽業(yè),也是最重要的人獸共患病病原之一,并威脅人類健康[1-3]。AIV通過結(jié)構(gòu)蛋白識別宿主細胞表面受體并與受體結(jié)合感染細胞,其中HA蛋白作為最重要的保護性抗
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本文編號:1024401
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