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過表達CD44v6基因?qū)θ舜竽c癌SW480細胞侵襲遷移能力的影響

發(fā)布時間:2017-10-12 07:40

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【摘要】:目的:研究CD44v6基因過表達對SW480細胞侵襲和遷移能力的影響.方法:慢病毒介導(dǎo)的CD44v6過表達細胞(CD44v6組)和空載體對照細胞(NC組)由前期實驗構(gòu)建.采用熒光顯微鏡觀察增強型綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)表達、實時熒光定量PCR檢測CD44v6 mRNA表達水平、免疫熒光檢測Flag標簽蛋白三種方法重新鑒定過表達細胞模型;CCK-8法檢測細胞增殖活性;劃痕試驗和Transwell試驗檢測細胞侵襲和遷移能力.結(jié)果:綠色熒光蛋白觀察顯示細胞轉(zhuǎn)染效率近100%;實時熒光定量PCR顯示CD44v6組細胞CD44v6 mRNA表達水平較對照組.顯著升高(P0.001);Flag標簽蛋白免疫熒光染色顯示過表達CD44v6蛋白主要定位于細胞膜.CCK-8結(jié)果顯示2組細胞增殖無明顯差異;劃痕試驗結(jié)果顯示CD44v6組細胞劃痕愈合指數(shù)較對照組顯著增高(P0.05);Transwell試驗結(jié)果顯示CD44v6組細胞遷移和侵襲相關(guān)指數(shù)均較對照組顯著增高(均P0.05),且CD44v6抗體處理后,CD44v6組細胞遷移和侵襲相關(guān)指數(shù)均較前顯著減低(均P0.05).結(jié)論:CD44v6基因過表達能顯著增強SW480細胞侵襲和遷移能力.
【作者單位】: 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤外科;
【關(guān)鍵詞】大腸癌 侵襲 轉(zhuǎn)移 CDv 過表達
【基金】:溫州市科技局基金資助項目,No.Y20140713 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院科研孵化基金資助項目,No.FHY2014013~~
【分類號】:R735.34
【正文快照】: ■背景資料C D 4 4 v 6是最為公認的大腸癌腫瘤干細胞標志物之一,被認為與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及不良預(yù)后相關(guān).但目前研究大多局限于臨床相關(guān)性水平,缺乏細胞及動物水平的功能機制研究.建立可靠的細胞模型,對深入研究分子機制具有重要意義. ■同行評議者肖秀英,副主任醫(yī)師,上海交通,

本文編號:1017520

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