本文關(guān)鍵詞：基于鏈置換循環(huán)無(wú)標(biāo)記檢測(cè)端粒酶RNA的熒光法

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【摘要】：以氧化石墨烯(GO)作為DNA載體和熒光猝滅劑,SYBR GreenⅠ(SGⅠ)為熒光信號(hào)探針,發(fā)夾核酸探針為分子識(shí)別探針,基于目標(biāo)物啟動(dòng)的發(fā)夾核酸探針鏈置換循環(huán)反應(yīng),建立了一種利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移和鏈置換循環(huán)放大技術(shù)檢測(cè)端粒酶RNA(h TR)的熒光新方法.發(fā)夾核酸探針hp DNA1和hp DNA2吸附在GO表面,嵌插在發(fā)夾DNA探針莖部的SGⅠ的熒光信號(hào)被GO猝滅.當(dāng)人工合成的目標(biāo)物(T1)存在時(shí),T1與hp DNA1雜交打開(kāi)hp DNA1的莖-環(huán)結(jié)構(gòu)而引發(fā)hp DNA2與T1之間的鏈置換循環(huán)反應(yīng),由此累積產(chǎn)生大量的hp DNA1/hp DNA2雜交雙鏈.剛性的雙鏈DNA脫離GO表面,導(dǎo)致所嵌插的SGⅠ產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光信號(hào).基于熒光信號(hào)的變化,可定量檢測(cè)0.2~50 nmol/L的T1,檢出限為90 pmol/L.該方法為端粒酶RNA檢測(cè)提供了一種高靈敏、高特異性且無(wú)需標(biāo)記的熒光新途徑.
【作者單位】： 陜西師范大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院陜西省生命分析重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 端粒酶RNA 鏈置換循環(huán) 熒光共振能量轉(zhuǎn)移 無(wú)標(biāo)記
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):21075079,21375086) 陜西省創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)研究計(jì)劃項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):2014KCT-28) 陜西師范大學(xué)中央高�；痦�(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):GK261001097) 長(zhǎng)江學(xué)者高校創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):IRT-14R33)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：Q55;O657.3
【正文快照】： 端粒酶(Telomerase)是一種核糖核蛋白酶,其主要功能是催化端粒(Telomere)末端不斷延伸(TTAGGG)n序列,從而克服細(xì)胞分裂過(guò)程中的端�？s短問(wèn)題.研究表明,端粒酶在85%以上的人類(lèi)腫瘤細(xì)胞中被高表達(dá),而在正常體細(xì)胞中的表達(dá)量則極低甚至不表達(dá).因此,端粒酶與細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化及持續(xù)

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 范宏亮;張濤;金偉;金欽漢;;基于脫氧核酶的無(wú)標(biāo)記端粒酶檢測(cè)新方法[J];高等學(xué)�；瘜W(xué)學(xué)報(bào);2015年04期

2 ZHANG LingHui;TANG Zhuo;;RNA-primed allele-specific PCR[J];Science China(Chemistry);2014年07期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 Jiuhai Wang;Zeeshan Ali;Nianyue Wang;Wenbiao Liang;Hongna Liu;Fu Li;Haowen Yang;Lei He;Libo Nie;Nongyue He;Zhiyang Li;;Simultaneous extraction of DNA and RNA from Escherichia coli BL 21 based on silica-coated magnetic nanoparticles[J];Science China(Chemistry);2015年11期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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1 郭秋平;趙下雨;謝琴;王柯敏;萬(wàn)俊;袁寶銀;譚譽(yù)宇;;基于免標(biāo)記發(fā)夾型探針和核酸外切酶Ⅲ的熒光信號(hào)放大DNA檢測(cè)[J];高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào);2014年08期

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本文編號(hào)：927188