發(fā)布時(shí)間：2017-08-18 14:35

  本文關(guān)鍵詞：共振光散射探針技術(shù)靈敏檢測(cè)生物及藥物分子

  更多相關(guān)文章： DNA 共振光散射 藥物 表面活性劑 金納米粒子

【摘要】：共振光散射技術(shù)(RLS)具備操作簡(jiǎn)易和靈敏度高的突出優(yōu)勢(shì),已經(jīng)成功地運(yùn)用于檢測(cè)生物和藥物分子。本論文利用RLS技術(shù),選擇一系列探針,檢測(cè)藥物和DNA的含量。具體內(nèi)容包括:引入原花青素和溴化十六烷基吡啶(CPB),使DNA的RLS信號(hào)發(fā)生變化,在此基礎(chǔ)上找到一種測(cè)定小牛胸腺DNA含量的新方法。這種方法的檢出限已經(jīng)達(dá)到納克級(jí)別。在最佳的實(shí)驗(yàn)條件下(291 nm,pH 7.0),原花青素和CPB可以明顯使DNA的RLS信號(hào)增強(qiáng)。在0.0084~3.36μg·mL 1濃度范圍內(nèi),RLS強(qiáng)度增加值(RLS?I)與DNA濃度有很好的線性關(guān)系,線性方程為RLS?I=6.70+70.72c(c,μg·mL 1),檢測(cè)限為2.27 ng·mL 1。分析了三種合成的DNA樣品,回收率為102.3%~107.1%,RSD為1.4%~4.1%。在山姜素/桑色素和十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)存在的情況下,利用RLS技術(shù)來(lái)研究?jī)蓚�(gè)新的三元復(fù)合物,實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA含量的靈敏檢測(cè)。當(dāng)pH 7.4時(shí),由于山姜素/桑色素 CTAB和DNA之間發(fā)生了相互作用,致使RLS信號(hào)顯著增加。針對(duì)山姜素/桑色素 CTAB DNA兩個(gè)體系,RLS?I與DNA濃度之間均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。檢測(cè)限(S/N=3)分別為2.71 ng·mL 1和2.41 ng·mL-1,回收率分別是99.6%~102.6%和96.6%~100.5%。葛根素 AuNPs和槲皮素 AuNPs分別作為RLS探針,靈敏地測(cè)定了DNA含量。通過(guò)靜電引力,DNA可以與葛根素 AuNPs或槲皮素 AuNPs形成復(fù)合物,引起RLS強(qiáng)度增強(qiáng)。槲皮素 AuNPs DNA的體系線性范圍是0.0081~4.0μg·mL 1,葛根素 AuNPs DNA體系線性范圍是0.0068~3.4μg·mL 1。測(cè)定三種合成樣品,得到滿意結(jié)果�；厥章史謩e為98.8%~101.7%和98.7%~101.8%。利用合成的金納米棒(AuNRs)作為RLS探針檢測(cè)丁香酚含量。丁香酚的RLS信號(hào)很弱,加入AuNRs使其RLS的信號(hào)明顯增強(qiáng)。紫外、RLS光譜和掃描電鏡(SEM)的結(jié)果都表明丁香酚和AuNRs發(fā)生了相互作用,形成了丁香酚 AuNRs復(fù)合物。新的復(fù)合物是丁香酚和AuNRs之間通過(guò)配位鍵組裝而成的。該方法的線性范圍為0.043~10.60μg·mL 1,線性方程為RLS?I=92.8+70.4 c(c,μg·mL 1),檢出限是7.28 ng·mL 1。運(yùn)用此方法測(cè)定了合成樣品的回收率為99.7%~104.2%,RSD為0.81%~1.19%(n=5)。運(yùn)用此方法檢測(cè)了咖喱粉中丁香酚的含量�；贏uNRs修飾山姜素,利用RLS技術(shù)靈敏檢測(cè)山姜素。在pH 7.4的Tris HCl緩沖溶液中,山姜素和AuNRs通過(guò)靜電引力相互結(jié)合形成山姜素 AuNRs聚合物,顯示出高的RLS強(qiáng)度。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下,體系的RLS強(qiáng)度增加值RLS?I與山姜素濃度(0.027~3.24μg·mL 1)呈良好的線性關(guān)系,檢出限為1.79 ng·mL 1。應(yīng)用該方法檢測(cè)了合成樣品中的山姜素,回收率為95.1%~103.7%,RSD為0.28%~3.9%(n=5)。應(yīng)用共振光散射光譜技術(shù)建立了測(cè)定槲皮素含量的新體系。當(dāng)pH=8.0,槲皮素和AuNPs通過(guò)靜電引力相互作用,形成了槲皮素 AuNPs二元的復(fù)合物,導(dǎo)致共振光信號(hào)在467 nm出現(xiàn)最大值。RLS信號(hào)的增加值與槲皮素的濃度(0.0604~4.53μg·mL 1)成正比關(guān)系,檢出限為1.49 ng·mL 1。該方法具備靈敏度高、簡(jiǎn)便和快速的優(yōu)點(diǎn)。測(cè)定三種合成樣品的回收率為96.7%~102.8%,RSD為0.7%~1.5%。
【關(guān)鍵詞】：DNA 共振光散射 藥物 表面活性劑 金納米粒子
【學(xué)位授予單位】：長(zhǎng)春師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：O657.3
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-12
• 第1章 緒論12-25
• 1.1 共振光散射光譜技術(shù)12-21
• 1.1.1 RLS的產(chǎn)生12-13
• 1.1.2 RLS的發(fā)展13
• 1.1.3 RLS優(yōu)勢(shì)13-14
• 1.1.4 RLS在生物大分子測(cè)定中的應(yīng)用14-19
• 1.1.5 RLS在藥物分子測(cè)定中的應(yīng)用19
• 1.1.6 RLS在環(huán)境檢測(cè)中的應(yīng)用19
• 1.1.7 RLS在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用19-21
• 1.2 金納米粒子21-24
• 1.2.1 金納米粒子的概述21-22
• 1.2.2 金納米粒子的發(fā)展22
• 1.2.3 金納米粒子的合成方法22-24
• 1.2.4 金納米粒子的應(yīng)用24
• 1.3 本論文的研究?jī)?nèi)容24-25
• 第2章 原花青素 CPB DNA三元體系共振光散光譜及其應(yīng)用25-38
• 2.1 前言25-26
• 2.1.1 原花青素25-26
• 2.1.2 十六烷基溴化吡啶26
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分26-28
• 2.2.1 儀器26
• 2.2.2 試劑26-27
• 2.2.3 實(shí)驗(yàn)過(guò)程27-28
• 2.3 結(jié)果與討論28-38
• 2.3.1 原花青素 CPB DNA系統(tǒng)的RLS光譜28-29
• 2.3.2 原花青素紫外吸收光譜圖29-31
• 2.3.3 原花青素 CPB DNA體系的紫外可見(jiàn)吸收光譜的研究31-32
• 2.3.4 條件最優(yōu)化32-35
• 2.3.5 離子強(qiáng)度的影響35
• 2.3.6 共存物質(zhì)的干擾35-36
• 2.3.7 工作曲線與檢出限36
• 2.3.8 應(yīng)用分析36-38
• 第3章 在山姜素/桑色素存在下對(duì)CTAB DNA體系的共振光散射光譜法的研究及應(yīng)用38-50
• 3.1 前言38-40
• 3.1.1 山姜素38-39
• 3.1.2 桑色素39
• 3.1.3 CTAB39-40
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分40-41
• 3.2.1 儀器40
• 3.2.2 試劑40
• 3.2.3 實(shí)驗(yàn)過(guò)程40-41
• 3.3 結(jié)果與討論41-50
• 3.3.1 山姜素/桑色素 CTAB DNA體系的RLS圖41-43
• 3.3.2 pH的影響43-44
• 3.3.3 反應(yīng)時(shí)間與加樣順序的影響44
• 3.3.4 CTAB濃度的影響44-45
• 3.3.5 山姜素/桑色素濃度的影響45-46
• 3.3.6 離子強(qiáng)度的影響46-47
• 3.3.7 共存物質(zhì)的影響47
• 3.3.8 工作曲線與檢出限47-48
• 3.3.9 應(yīng)用分析48-50
• 第4章 槲皮素/葛根素 AuNPs DNA的共振光散射光譜的研究和應(yīng)用50-62
• 4.1 前言50-51
• 4.1.1 槲皮素50
• 4.1.2 葛根素50-51
• 4.2 實(shí)驗(yàn)部分51-53
• 4.2.1 儀器51
• 4.2.2 試劑51-52
• 4.2.3 實(shí)驗(yàn)過(guò)程52-53
• 4.3 結(jié)果與討論53-62
• 4.3.1 槲皮素/葛根素 AuNPs DNA體系的TEM圖53-55
• 4.3.2 槲皮素/葛根素 AuNPs DNA體的共振光散射光譜55-56
• 4.3.3 條件最優(yōu)化56-58
• 4.3.4 離子強(qiáng)度的影響58-59
• 4.3.5 共存物質(zhì)的影響59-60
• 4.3.6 工作曲線和檢出限60
• 4.3.7 樣品分析60-62
• 第5章 金納米棒作為共振光散射探針測(cè)定丁香酚62-74
• 5.1 前言62-63
• 5.2 實(shí)驗(yàn)部分63-65
• 5.2.1 儀器63
• 5.2.2 試劑63
• 5.2.3 實(shí)驗(yàn)過(guò)程63-65
• 5.3 結(jié)果與討論65-74
• 5.3.1 金納米棒及丁香酚 AuNRs體系的SEM圖65-67
• 5.3.2 丁香酚 Au NRs體系共振光散射光譜研究67-68
• 5.3.3 丁香酚 Au NRs體系的紫外可見(jiàn)吸收光譜的研究68-69
• 5.3.4 條件最優(yōu)化69-70
• 5.3.5 離子強(qiáng)度的影響70-71
• 5.3.6 共存物質(zhì)的干擾71-72
• 5.3.7 工作曲線和檢出限72
• 5.3.8 應(yīng)用分析72-74
• 第6章 金納米棒作為共振光散射技術(shù)探針靈敏檢測(cè)山姜素74-84
• 6.1 前言74
• 6.2 實(shí)驗(yàn)部分74-76
• 6.2.1 儀器74
• 6.2.2 試劑74
• 6.2.3 實(shí)驗(yàn)過(guò)程74-76
• 6.3 結(jié)果與討論76-84
• 6.3.1 金納米棒及山姜素 AuNRs的大小和形貌76
• 6.3.2 山姜素 Au NRs體系的共振光散射光譜特征76-77
• 6.3.3 山姜素 Au NRs體系紫外可見(jiàn)吸收光譜的研究77-78
• 6.3.4 不同pH山姜素的紫外吸收光譜的研究78-79
• 6.3.5 條件最優(yōu)化79-81
• 6.3.6 離子強(qiáng)度的影響81
• 6.3.7 共存物質(zhì)的影響81-82
• 6.3.8 工作曲線與檢出限82-83
• 6.3.9 樣品檢測(cè)83-84
• 第7章 金納米粒子作為共振光散射探針測(cè)定槲皮素84-93
• 7.1 前言84
• 7.2 實(shí)驗(yàn)部分84-85
• 7.2.1 儀器84
• 7.2.2 試劑84
• 7.2.3 實(shí)驗(yàn)過(guò)程84-85
• 7.3 結(jié)果與討論85-93
• 7.3.1 金納米粒子及槲皮素 AuNPs體系的TEM圖85-86
• 7.3.2 槲皮素 AuNPs體系共振光散射光譜研究86
• 7.3.3 槲皮素 AuNPs體系的紫外可見(jiàn)吸收光譜的研究86-87
• 7.3.4 不同pH槲皮素的紫外吸收光譜的研究87-88
• 7.3.5 條件最優(yōu)化88-90
• 7.3.6 離子強(qiáng)度的影響90-91
• 7.3.7 共存離子的干擾91
• 7.3.8 工作曲線和檢出限91-92
• 7.3.9 樣品檢測(cè)92-93
• 結(jié)論93-95
• 參考文獻(xiàn)95-106
• 作者攻讀碩士學(xué)位期間主要研究成果106-108
• 致謝108

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6 陳展光;共振光散射技術(shù)測(cè)定生物大分子的新方法[D];中南大學(xué);2005年

7 孫少凱;免標(biāo)記光學(xué)探針和多模態(tài)成像探針的構(gòu)建[D];南開(kāi)大學(xué);2013年

8 陳艷華;高分子化合物的電化學(xué)性質(zhì)及在蛋白測(cè)定中的應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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