本文關(guān)鍵詞：重組Pyrococcus furiosus葡聚糖磷酸化酶催化淀粉合成葡萄糖-1-磷酸

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【摘要】：將Pyrococcus furiosus來源的編碼葡聚糖磷酸化酶的glg P基因進(jìn)行稀有密碼子優(yōu)化,在E.coli中重組表達(dá)并催化淀粉合成G-1-P。在反應(yīng)條件優(yōu)化基礎(chǔ)上,以不同的淀粉為底物,GPase均表現(xiàn)出較強(qiáng)的催化能力。在原料預(yù)處理、高濃度底物催化及補(bǔ)料催化研究的基礎(chǔ)上,以7.5%玉米淀粉為初始底物,反應(yīng)16 h后補(bǔ)入2.5%玉米淀粉,繼續(xù)反應(yīng)32 h,G-1-P產(chǎn)量達(dá)250.34 mmol·L~(-1),底物轉(zhuǎn)化率達(dá)65.1%,與相同濃度的可溶性淀粉相比,G-1-P產(chǎn)量及轉(zhuǎn)化率(252.9mmol·L~(-1),65.9%)均相近,表明廉價(jià)易得的玉米淀粉可以代替可溶性淀粉為原料生產(chǎn)G-1-P,大幅降低G-1-P生產(chǎn)的原料成本。
【作者單位】： 浙江大學(xué)生物質(zhì)化工教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室浙江大學(xué)化學(xué)工程與生物工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 葡聚糖磷酸化酶 葡萄糖--磷酸 酶催化 淀粉
【分類號】：Q814;O629
【正文快照】： 1引言葡萄糖-1-磷酸(G-1-P)廣泛存在于動(dòng)植物以及微生物中,在生物體中起著重要的作用[1],如G-1-P是糖原降解的第一個(gè)產(chǎn)物,在葡萄糖磷酸變位酶(EC 5.4.2.2)的作用下生成葡萄糖-6-磷酸,進(jìn)入EMP途徑[2];此外G-1-P還是合成核酸二磷酸葡萄糖(NDPG)的起始物質(zhì),NDPG可進(jìn)一步用于各種

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