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呋喃脂肪酸的質(zhì)譜檢測方法建立及其對ob/ob小鼠生理功能的影響研究

發(fā)布時間:2023-04-02 05:45
  呋喃脂肪酸是一類含有呋喃五元雜環(huán)的脂肪酸,主要存在于一些綠色植物、海藻和魚中。近年來的研究表明,呋喃脂肪酸的一個代謝產(chǎn)物3-羧基-4-甲基-5-丙基-2-呋喃丙酸(3-carboxy-4-methyl-5-propyl-2-furanpropanoic acid,CMPF)的含量在妊娠期糖尿病患者、糖耐量受損患者和二型糖尿病患者體內(nèi)顯著上升,并且可以導(dǎo)致胰島素分泌受損。然而,呋喃脂肪酸至CMPF的代謝通路尚不清晰,對糖尿病病人生理功能的影響也尚無定論。據(jù)報道,呋喃脂肪酸在食品和生物樣本中的存在含量極低,普通的檢測方法難以實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確定性和精準(zhǔn)定量。因此,建立靈敏的質(zhì)譜檢測方法,實(shí)現(xiàn)食品和生物樣本中呋喃脂肪酸的精準(zhǔn)定量,是揭示呋喃脂肪酸代謝的重要手段和前提。此外,研究呋喃脂肪酸對糖尿病病人生理功能的影響,有助于闡釋呋喃脂肪酸的生物學(xué)意義。本研究利用現(xiàn)代質(zhì)譜技術(shù)中常用的GC-TQ/MS、UPLC/ESI-MS/MS和多維質(zhì)譜鳥槍法,研究了食用油脂、人體血漿以及食品用天然乳膠材料中呋喃脂肪酸的種類及含量。進(jìn)而,探索了呋喃脂肪酸對ob/ob小鼠生理功能的影響,并對其潛在的代謝產(chǎn)物進(jìn)行了定量分析。主...

【文章頁數(shù)】:154 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 呋喃脂肪酸概述
        1.1.1 呋喃脂肪酸的來源
        1.1.2 呋喃脂肪酸的生物合成
        1.1.3 呋喃脂肪酸的功能
        1.1.4 呋喃脂肪酸的代謝
    1.2 3-羧基-4-甲基-5-丙基-2-呋喃丙酸(CMPF)概述
        1.2.1 CMPF與糖尿病之間的關(guān)系
        1.2.2 CMPF與腎病之間的關(guān)系
        1.2.3 CMPF與健康的關(guān)系
    1.3 呋喃脂肪酸的檢測方法
        1.3.1 呋喃脂肪酸的富集
        1.3.2 呋喃脂肪酸的檢測
    1.4 本課題研究背景、意義以及主要研究內(nèi)容
        1.4.1 研究背景及意義
        1.4.2 研究內(nèi)容
第二章 呋喃脂肪酸的GC-TQ/MS分析方法的建立及應(yīng)用
    2.1 引言
    2.2 材料與儀器
        2.2.1 材料及試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 呋喃脂肪酸的不同衍生化方法
        2.3.2 GC-MS檢測衍生化產(chǎn)物的實(shí)驗(yàn)條件
        2.3.3 MRM模式下的質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化及離子對設(shè)置
        2.3.4 常見油脂中呋喃脂肪酸的定性及定量
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 GC-MS的全掃描監(jiān)測模式
        2.4.2 呋喃脂肪酸在EI離子源中離子化時的裂解機(jī)制
        2.4.3 全掃描監(jiān)測模式下的檢測限和定量限
        2.4.4 利用SIM監(jiān)測模式探索呋喃脂肪酸同系物
        2.4.5 MRM監(jiān)測模式下呋喃脂肪酸的監(jiān)測離子對
        2.4.6 全掃描、SIM和 MRM監(jiān)測模式的比較
        2.4.7 精密度和準(zhǔn)確度
        2.4.8 幾種呋喃脂肪酸檢測方法的比較
        2.4.9 常見食用油脂中的呋喃脂肪酸的定量
    2.5 本章小結(jié)
第三章 UPLC/ESI-MS/MS在呋喃脂肪酸定性及定量中的應(yīng)用
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
        3.2.1 材料及試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 衍生化試劑的合成
        3.3.2 標(biāo)準(zhǔn)品與質(zhì)控樣品的配制
        3.3.3 呋喃脂肪酸的衍生
        3.3.4 基質(zhì)標(biāo)曲的建立
        3.3.5 呋喃脂肪酸衍生物的色譜出峰順序
        3.3.6 方法開發(fā)及驗(yàn)證
        3.3.7 人體血漿樣品前處理方法
        3.3.8 呋喃脂肪酸的檢測方法優(yōu)化
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 非衍生化方法
        3.4.2 衍生化方法
        3.4.3 呋喃脂肪酸的色譜性質(zhì)
        3.4.4 方法驗(yàn)證
        3.4.5 方法選擇性
        3.4.6 線性范圍
        3.4.7 人體血漿中呋喃脂肪酸的靶向定量
        3.4.8 人體血漿中呋喃脂肪酸的非靶向定量
    3.5 本章小結(jié)
第四章 多維質(zhì)譜鳥槍法在呋喃脂肪酸的定性及定量中的應(yīng)用
    4.1 引言
    4.2 材料與儀器
        4.2.1 材料及試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 脂質(zhì)組的萃取
        4.3.2 多維質(zhì)譜鳥槍法測定脂質(zhì)組
        4.3.3 脂質(zhì)的萃取及甲酯化
        4.3.4 GC-MS測定脂肪酸組成
        4.3.5 UPLC/ESI-HRMS/MS測定呋喃脂肪酸
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 MDMS-SL分析脂質(zhì)組
        4.4.2 GC-MS分析脂肪酸組成
        4.4.3 UPLC/ESI-HRMS/MS分析脂肪酸
    4.5 本章小結(jié)
第五章 呋喃脂肪酸在ob/ob小鼠體內(nèi)的代謝及其功能評價
    5.1 引言
    5.2 材料與儀器
        5.2.1 材料及試劑
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 實(shí)驗(yàn)動物模型
        5.3.2 呋喃脂肪酸-橄欖油混合物的配制
        5.3.3 實(shí)驗(yàn)動物的處理
        5.3.4 血漿和血清的制備
        5.3.5 組織石蠟包埋切片實(shí)驗(yàn)步驟
        5.3.6 H&E染色實(shí)驗(yàn)步驟
        5.3.7 血漿中CMPF及其類似物的提取
        5.3.8 血漿中CMPF及其類似物的檢測
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 小鼠體重及各項(xiàng)生理指標(biāo)的變化
        5.4.2 血漿CMPF及其類似物的含量
        5.4.3 肝臟和腎臟H&E染色結(jié)果
    5.5 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
    1.主要研究結(jié)論
    2.主要創(chuàng)新點(diǎn)
    3.未來工作展望
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀博士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
附件



本文編號:3778663

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