谷胱甘肽作為一種小分子生物硫醇,在生物體內(nèi)的眾多生理和病理過程中都發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,其含量的異常和各種疾病有著密不可分的關(guān)系。谷胱甘肽也通常在腫瘤細(xì)胞內(nèi)過度表達(dá),所以被當(dāng)作一種重要的生物標(biāo)志物。因此,構(gòu)建一種對(duì)細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽進(jìn)行檢測(cè)和成像的熒光探針具有十分重要的診斷意義。進(jìn)一步,如果能夠在診斷的同時(shí),精準(zhǔn)釋放藥物進(jìn)行治療,將具有更加廣闊的應(yīng)用前景。在研究中,我們?cè)O(shè)計(jì)并合成了一種細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽響應(yīng)型近紅外熒光探針。將可斷裂的二硫鍵和近紅外熒光團(tuán)通過碳酸酯鍵連接起來,碳酸酯鍵的吸電子作用使得近紅外熒光團(tuán)的熒光發(fā)生淬滅。利用核磁共振氫譜和高分辨質(zhì)譜對(duì)中間產(chǎn)物及熒光探針進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征,確定了其化學(xué)結(jié)構(gòu)的正確性。在谷胱甘肽的激活下,二硫鍵斷裂,近紅外熒光團(tuán)被釋放從而恢復(fù)熒光。經(jīng)光譜學(xué)性能分析,驗(yàn)證了熒光探針對(duì)谷胱甘肽具有較好的時(shí)間依賴性和濃度依賴性,檢測(cè)下限低至0.27μM,同時(shí)具有良好的選擇性。采用MTT實(shí)驗(yàn)證明了熒光探針的較低細(xì)胞毒性,并通過熒光成像證實(shí)了其對(duì)細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽的良好成像能力。在此基礎(chǔ)上,我們還設(shè)計(jì)并合成了一種谷胱甘肽響應(yīng)型納米前藥。通過二硫鍵將黃酮類藥物槲皮素和激酶抑制劑吉... 

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 熒光探針
        1.2.1 熒光探針簡(jiǎn)述
        1.2.2 熒光探針響應(yīng)機(jī)理及應(yīng)用進(jìn)展
        1.2.3 谷胱甘肽的熒光檢測(cè)
    1.3 前藥
        1.3.1 前藥簡(jiǎn)述
        1.3.2 腫瘤微環(huán)境刺激響應(yīng)型前藥
    1.4 生物成像在腫瘤治療中的應(yīng)用
    1.5 本課題的提出及研究?jī)?nèi)容
第二章 谷胱甘肽響應(yīng)型近紅外熒光探針的制備及檢測(cè)應(yīng)用
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 原料與試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.3 熒光探針Cy-SS-Cy的合成
        2.2.4 熒光探針的光譜學(xué)測(cè)試
        2.2.5 熒光探針的細(xì)胞熒光成像實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 熒光探針的細(xì)胞毒性評(píng)估
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 熒光探針及其中間產(chǎn)物的合成
        2.3.2 熒光探針與谷胱甘肽共培養(yǎng)后不同時(shí)間點(diǎn)的熒光光譜
        2.3.3 熒光探針在不同濃度的谷胱甘肽作用下的熒光光譜
        2.3.4 熒光探針對(duì)谷胱甘肽的檢測(cè)下限的確定
        2.3.5 熒光探針檢測(cè)谷胱甘肽的專一性
        2.3.6 熒光探針的細(xì)胞毒性
        2.3.7 熒光探針對(duì)細(xì)胞中谷胱甘肽成像
    2.4 本章小結(jié)
第三章 谷胱甘肽響應(yīng)型納米前藥的制備及在腫瘤抑制中的應(yīng)用
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 原料和試劑
        3.2.2 測(cè)試與儀器
        3.2.3 納米前藥G-SS-Q的合成與制備
        3.2.4 納米前藥的光譜學(xué)性能測(cè)試
        3.2.5 納米前藥的谷胱甘肽響應(yīng)行為研究
        3.2.6 納米前藥在活細(xì)胞內(nèi)熒光成像實(shí)驗(yàn)
        3.2.7 納米前藥的細(xì)胞毒性測(cè)試
        3.2.8 納米前藥的細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
        3.2.9 活體腫瘤抑制及毒性實(shí)驗(yàn)
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 納米前藥體系及其中間產(chǎn)物的合成及結(jié)構(gòu)確認(rèn)
        3.3.2 納米前藥的光譜學(xué)性質(zhì)
        3.3.3 納米前藥對(duì)谷胱甘肽的響應(yīng)行為考察
        3.3.4 納米前藥的細(xì)胞內(nèi)熒光成像
        3.3.5 納米前藥的細(xì)胞毒性
        3.3.6 納米前藥對(duì)荷瘤小鼠模型中的腫瘤抑制效果評(píng)價(jià)
    3.4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
附件



本文編號(hào)：3706659