電化學免疫傳感是將電化學技術與免疫識別技術相結合而發(fā)展形成的新型生物傳感器。它主要是以抗原-抗體之間的特異性識別為基礎,利用電化學工作站將生物化學信號轉換成電信號,從而實現(xiàn)對待測物的定量檢測。電化學免疫傳感因其儀器簡單、選擇性好、靈敏度高、檢測速度快等優(yōu)點已成為金黃色葡萄球菌檢測的重要手段之一。近年來,信號放大技術因其在提高免疫傳感器的靈敏度方面起到了很大的作用而備受研究者關注。實現(xiàn)信號放大主要有兩種方法:一是通過增大傳感界面上捕獲抗體的固載量實現(xiàn)信號的放大;二是利用生物酶或者模擬酶的催化性能設計納米識別探針實現(xiàn)信號的放大。因此,本文構建了三種基于信號放大策略的電化學免疫傳感器,并用于食品中金黃色葡萄球菌的高靈敏檢測。本論文的主要研究內容如下:1.基于CdTe量子點功能化碳納米球電化學免疫傳感的金黃色葡萄球菌檢測研究構建了一種基于碲化鎘量子點（CdTe QDS）功能化碳納米球（CNS）的電化學免疫傳感,并實現(xiàn)對金黃色葡萄球菌的高靈敏檢測。實驗首先合成了粒徑均勻的CdTe QDS和CNS,并利用帶正電的殼聚糖（CS）將帶負電的CdTe QDS功能化到帶負電的CNS表面。接著利用EDC/N... 

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞
第一章 緒論
    1.1 研究背景及意義
        1.1.1 食源性致病菌的危害
        1.1.2 金黃色葡萄球菌簡介
    1.2 金黃色葡萄球菌的檢測方法
        1.2.1 傳統(tǒng)檢測方法
        1.2.2 分子生物學與免疫學方法
        1.2.3 電化學免疫傳感方法
            1.2.3.1 電化學免疫傳感原理及分類
            1.2.3.2 電化學免疫傳感的信號輸出方法
            1.2.3.3 電化學免疫傳感方法在金黃色葡萄球菌檢測中的應用
    1.3 納米材料在電化學免疫傳感器中的應用
        1.3.1 固定生物分子構建導電性能好的傳感平臺
        1.3.2 標記生物分子合成信號放大型的納米探針
    1.4 本文研究內容
第二章 基于CdTe量子點功能化碳納米球電化學免疫傳感的金黃色葡萄球菌檢測研究
    2.1 引言
    2.2 實驗
        2.2.1 實驗試劑
        2.2.2 實驗儀器
        2.2.3 培養(yǎng)基的配制
        2.2.4 金黃色葡萄球菌的增菌、涂布和計數(shù)
        2.2.5 納米材料的制備
            2.2.5.1 CNS的制備
            2.2.5.2 CdTe QDS的制備
            2.2.5.3 CNS@CdTe-Ab納米探針的制備
        2.2.6 電化學免疫傳感器的構建
        2.2.7 金黃色葡萄球菌的電化學檢測
    2.3 結果與討論
        2.3.1 CNS@CdTe納米探針的表征
            2.3.1.1 透射電子顯微鏡表征
            2.3.1.2 X射線光電子能譜表征
            2.3.1.3 Zeta電勢表征
        2.3.2 修飾電極的表征
            2.3.2.1 電化學表征
            2.3.2.2 原子力顯微鏡表征
        2.3.3 免疫傳感器檢測條件的優(yōu)化
            2.3.3.1 捕獲抗體濃度的優(yōu)化
            2.3.3.2 免疫反應時間的優(yōu)化
            2.3.3.3 檢測液pH值的優(yōu)化
        2.3.4 金黃色葡萄球菌的檢測
        2.3.5 免疫傳感器的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和特異性
        2.3.6 實際樣品的檢測
    2.4 結論
第三章 DNAzyme功能化金/鉑納米探針的合成及其對金黃色葡萄球菌的高靈敏檢測
    3.1 引言
    3.2 實驗
        3.2.1 實驗試劑
        3.2.2 實驗儀器
        3.2.3 金黃色葡萄球菌的增菌、涂布和計數(shù)
        3.2.4 納米材料的制備
            3.2.4.1 AuNPs的制備
            3.2.4.2 GO@AuNPs的制備
            3.2.4.3 Au@Pt納米復合材料的制備
            3.2.4.4 Strep-Au@Pt-DNAzyme納米探針的制備
        3.2.5 電化學免疫傳感器的制備
        3.2.6 金黃色葡萄球菌的電化學檢測
    3.3 結果與討論
        3.3.1 GO@AuNPs納米復合材料的表征
        3.3.2 納米探針的表征
        3.3.3 免疫傳感器檢測條件的優(yōu)化
            3.3.3.1 捕獲抗體濃度的優(yōu)化
            3.3.3.2 免疫反應時間的優(yōu)化
            3.3.3.3 親和反應時間的優(yōu)化
            3.3.3.4 H_2O_2濃度的優(yōu)化
        3.3.4 不同免疫傳感器的催化性能比較
        3.3.5 金黃色葡萄球菌的檢測
        3.3.6 免疫傳感器的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和特異性
        3.3.7 實際樣品的檢測
    3.4 結論
第四章 二茂鐵二甲酸(Fc)功能化的聚苯乙烯-丙烯酸球(PSA)模擬酶信號放大策略的構建及其在電化學免疫傳感中的應用研究
    4.1 引言
    4.2 實驗
        4.2.1 實驗試劑
        4.2.2 實驗儀器
        4.2.3 金黃色葡萄球菌的增菌、涂布和計數(shù)
        4.2.4 納米材料的制備
            4.2.4.1 PSA球的合成
            4.2.4.2 PSA@Fc的制備
            4.2.4.3 納米探針的制備
        4.2.5 電化學免疫傳感器的制備
        4.2.6 金黃色葡萄球菌的電化學檢測
    4.3 結果與討論
        4.3.1 PSA@Fc納米探針的表征
            4.3.1.1 透射電子顯微鏡表征
            4.3.1.2 傅里葉紅外光譜表征
        4.3.2 PSA表面Fc聚合機理的表征
        4.3.3 修飾電極的表征
        4.3.4 免疫傳感器檢測條件的優(yōu)化
            4.3.4.1 捕獲抗體濃度的優(yōu)化
            4.3.4.2 免疫反應時間的優(yōu)化
            4.3.4.3 H_2O_2濃度的優(yōu)化
            4.3.4.4 檢測液pH的優(yōu)化
        4.3.5 不同納米探針催化性能的比較
        4.3.6 金黃色葡萄球菌的檢測
        4.3.7 免疫傳感器的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和特異性
        4.3.8 實際樣品的檢測
    4.4 結論
第五章 總結與展望
    5.1 研究結論
    5.2 創(chuàng)新點
    5.3 展望
參考文獻
致謝
碩土期間研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]Fe3O4/聚苯乙烯-丙烯酸磁性微球的制備與表征[J]. 王祝敏,張鳳霞,馬云龍.  化工新型材料. 2014(12)
[4]金黃色葡萄球菌引起食物中毒的作用機制與其耐藥性的研究進展[J]. 李彥媚,趙喜紅,徐澤智,徐振波.  現(xiàn)代生物醫(yī)學進展. 2011(14)
[5]食品中金黃色葡萄球菌的熒光定量PCR檢測法[J]. 郭宏.  職業(yè)與健康. 2009(18)
[6]檢測食源性致病菌的生物傳感器[J]. 李杜娟,王劍平,應義斌,李延斌.  中國生物化學與分子生物學報. 2007(03)

博士論文
[1]基于納米材料新型電化學傳感器的制備及其在生物樣品分析中的應用研究[D]. 張新愛.華東師范大學 2011



本文編號：3649983